實驗室組織細胞破碎方法(超聲波細胞粉碎機）

實驗室對組織細胞的破碎方法很多,，有機械方法,、物理方法,、化學方法和生物化學方法等

　主要通過機械切力的作用使組織細胞破碎的方法,，常用的器械有組織搗碎機、勻漿器,、研缽和研磨,、壓榨器等。

　　1）組織搗碎機 一般用于動物組織,、植物肉質(zhì)種子,、柔嫩的葉芽等，轉(zhuǎn)速可高達10000rpm/M以上,。由于旋轉(zhuǎn)刀片的機械切力很大,制備一些較大分子如核酸則很少使用,。

　　2）勻漿器 勻漿器的研缽磨球和玻璃管內(nèi)壁之間間隙保持在十分之幾毫米距離，破碎細胞的程度比組織搗碎機高,。制作勻漿器的材料,，除玻璃外，還可以用硬質(zhì)塑料,、不銹鋼,、人造熒光樹脂等。

　　3）研缽 多用于細菌或其他堅硬植物材料,，研磨時常加入少量石英砂,，玻璃粉或其他研磨劑，以提高研磨效果,。

　　4）細菌磨 是一種改良了的研磨器,，比研缽具有更大的研磨面積，而且低部有出口,。操作時先把細菌和研磨粉調(diào)成糊狀,，每次加入一小勺，研磨20-30秒即可將細菌細胞*磨碎,。

　　2． JTONE物理法

　　主要通過各種物理因素使組織細胞破碎的方法,。在生化制備中常用的方法有：

　　1）反復凍溶法 先將樣品深冷至-15---20度使之凍固,，再緩慢的融化，反復多次,，多用于動物性材料,。

　　2）急熱驟冷法 將材料投入沸水中，維持85-90分鐘,，至水浴中急速冷卻,，此法可用于細菌及病毒材料。

　　3）超聲波處理 頻率一般選在10KC至200KC,，功率200-500瓦范圍,，處理時間有數(shù)分鐘至數(shù)十分鐘不等，處理過程中注意冷卻,。此法多用于微生物材料,。 

實驗室組織細胞破碎方法(超聲波細胞粉碎機）

　有自溶法，酶解法和表面活性劑法等,。

　　1）自溶法 在一定PH和適當?shù)臏囟认?，利用組織細胞內(nèi)自身的酶系統(tǒng)將細胞破碎的方法。此過程需較長時間,，常用少量防腐劑如甲苯,、仿等防止細胞的污染。

　　2）酶溶法 利用各種水解酶,，如溶菌酶,、纖維素酶、蝸牛酶,、半纖維素酶,、脂酶等，將細胞壁分解,，使細胞內(nèi)含物釋放出來,。有些細菌對溶菌酶不敏感，加入少量巰基試劑或8摩爾尿素處理后,，使之轉(zhuǎn)為對溶菌酶敏感而溶解,。

3）表面活性劑處理 如十二烷基硫酸鈉,、化十二烷基吡啶等,。

實驗室組織細胞破碎方法(超聲波細胞粉碎機）