QM100組織研磨儀研磨玉米葉方法

目的：

批量研磨玉米葉片，為后續(xù)提取核酸,，進(jìn)行遺傳或生理生化指標(biāo)分析研究提供方便,。為種子和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量管理部門,、種子公司等單位利用分子方法檢測樣品純度,、檢測純度真實性等實驗所必需的樣品前處理工作提供參考,。

地點：某種業(yè)育種和栽培實驗室

材料：新鮮玉米幼苗葉片

儀器：主機,，QM100組織研磨儀,；配件：2ml研磨適配器,直徑3或5mm研磨鋼珠

步驟：

1）取樣：取新鮮玉米幼苗葉片,，剪成直徑6~8mm大小碎片；

2）將3-5片葉片碎片置于2ml離心管（EP管）中,，同時加入1顆5mm和2顆3mm不銹鋼研磨鋼珠,。

3）將加入葉片和研磨鋼珠的EP管關(guān)蓋密封，放入QM100組織研磨儀研磨玉米葉方法的2ml研磨適配器中,，然后和適配器一起整體進(jìn)入液氮冷凍2-3分鐘或至液氮不“沸騰”為止,。

4）迅速從液氮中取出適配器，并迅速將其固定在研磨儀的搖臂中,；

5）設(shè)置QM100組織研磨儀研磨玉米葉方法的研磨時間為2分鐘,，研磨頻率1500rpm（1500次/分鐘）。

結(jié)果：

可以得到非常細(xì)碎的葉片粉末,，提取核酸效果很好,。

結(jié)論：

用行玉米葉片的冷凍研磨，可以直接將研磨管和適配器浸泡在液氮里,，只需一次性1-2分鐘的液氮冷凍和一次約2分鐘的研磨,，就能批量粉碎多達(dá)54個2.0ml的樣品（用96孔深孔板的話則是192個樣品）。處理時間迅速,，有效防止了溫升,，為后續(xù)有效提前核酸提供了保障。此外,，還大大節(jié)省液氮,，操作也更加。