硫酸鹽還原菌檢測(cè)：硫酸鹽還原菌（SRB）的危害與檢測(cè)

什么是硫酸鹽還原菌

硫酸鹽還原菌 (Sulfate-Reducing Bacteria,，簡(jiǎn)稱SRB) 是一種厭氧的微生物,。廣泛存在于土壤、海水,、河水,、地下管道以及油氣井等缺氧環(huán)境中。它能利用金屬表面的有機(jī)物作為碳源,，并利用細(xì)菌生物膜內(nèi)產(chǎn)生的氫,，將硫酸鹽還原成硫化氫。

硫酸鹽還原菌腐蝕的形成

在某些環(huán)境中,，硫酸鹽還原細(xì)菌（SRB）能夠在管道壁上聚集,，使管道可能發(fā)生局部點(diǎn)蝕。硫酸鹽還原菌與有機(jī)物質(zhì)和硫酸鹽反應(yīng)生成硫化氫和二氧化碳會(huì)與管道壁中的鐵反應(yīng),，產(chǎn)生不同形式的硫化鐵,。

硫化鐵和管道中其他形式的沉積物形成大量的黑色粉末，這些黑色粉末比管道碳鋼硬度大,，故會(huì)對(duì)管道部件造成嚴(yán)重的腐蝕危害,。

硫酸鹽還原菌的危害

• 儀器和控制閥的污染 - 結(jié)垢可能導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果不良，腐蝕會(huì)導(dǎo)致的部件損,；

• 堵塞過(guò)濾系統(tǒng) - 當(dāng)管道系統(tǒng)中含有過(guò)量的黑色粉末時(shí),，可能會(huì)導(dǎo)致過(guò)濾器壽命縮短；

• 管道 - 黑色粉末增加了管道內(nèi)壁表面的粗糙度,，可能會(huì)引起嚴(yán)重或不受控制的腐蝕以至于導(dǎo)致管道失效,；

對(duì)于SRB，水是其存在且發(fā)生代謝活動(dòng)的主要因素,，要減少SRB的腐蝕影響,，就需要對(duì)管道中的水汽進(jìn)行控制或消除，并用適當(dāng)?shù)纳餁鐒┻M(jìn)行控制,。

硫酸鹽還原菌的檢測(cè)

SRB的生物腐蝕帶來(lái)的危害和損失是巨大的,，然而在對(duì)SRB進(jìn)行控制和消除之前，需要對(duì)相關(guān)可能會(huì)發(fā)生腐蝕的場(chǎng)合進(jìn)行SRB檢測(cè)，以判斷SRB是否存在以及含量多少,，從而制定適當(dāng)?shù)闹卫矸桨浮?/span>

目前,，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)硫酸鹽還原菌的檢測(cè)方法進(jìn)行了許多探索和研究，發(fā)明了許多檢測(cè)技術(shù),，從原理上講,，主要分為：（1）培養(yǎng)法；（2）免疫學(xué)法,；（3）atp法,；（4）代謝產(chǎn)物定量法。

1培養(yǎng)法

培養(yǎng)法主要有測(cè)試瓶法,、瓊脂深層培養(yǎng)法和溶化瓊脂管法,。這些方法都是根據(jù)API RP-38美國(guó)石油學(xué)會(huì)推薦的地下注入水分析方法中的3管平行絕跡稀釋法（Disappearing Dilution Method）進(jìn)行的。

其中測(cè)試瓶法是利用瓶裝的含乳酸鹽,、硫酸鹽和fe2+（或金屬鐵）的培養(yǎng)基對(duì)待測(cè)水樣進(jìn)行接種培養(yǎng),，當(dāng)待測(cè)樣品中存在SRB時(shí)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)瓶底會(huì)出現(xiàn)黑色的沉淀（FeS）,，以此作為SRB生長(zhǎng)指示,，從而確定水樣中srb的含量。

該方法是目前國(guó)內(nèi)外zui為常用的SRB檢測(cè)方法,。但是該方法的檢測(cè)周期過(guò)長(zhǎng),，一般需要經(jīng)過(guò)28天的培養(yǎng)，并且得到的數(shù)據(jù)比較粗糙,，對(duì)低SRB含量的水樣可能無(wú)法檢出,。

2免疫學(xué)法

研究人員發(fā)現(xiàn)SRB胞內(nèi)有一種酶，即腺苷-5’-磷酸硫酸鹽還原酶（APS還原酶）,，這種酶為SRB所*,，是SRB的特征酶。所以相關(guān)研究人員發(fā)明了檢測(cè)SRB的新方法—免疫學(xué)法,。

該方法基于APS還原酶進(jìn)行,，這種酶能夠催化腺苷-5’-磷酸硫酸鹽還原酶發(fā)生還原反應(yīng)，并生產(chǎn)相關(guān)特定產(chǎn)物,。利用該產(chǎn)物與顯色劑發(fā)生顯色反應(yīng)的強(qiáng)弱,，并與比色卡比較，而得到樣品中SRB的含量,。該方法準(zhǔn)確,、簡(jiǎn)單,、快速,，且對(duì)SRB具有專一性，的能夠在15-40min內(nèi)的到結(jié)果，檢測(cè)結(jié)果易于觀察,，適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)使用,。

3atp法

三磷酸腺苷（ATP）是所有活的生物細(xì)胞中都具有的一種化合物，其含量與細(xì)胞濃度成正比,。細(xì)胞破碎后釋放出來(lái)的ATP與熒光素反應(yīng),，可測(cè)定出相應(yīng)的細(xì)菌含量。所以可以通過(guò)檢測(cè)水樣中的ATP含量來(lái)間接判斷srb數(shù)量,，但是該方法只能檢測(cè)微生物總數(shù),，所以檢出下限較高，不適用于低SRB含量的水樣,。

其次,，還有代謝產(chǎn)物定量法，以SRB新陳代謝產(chǎn)物硫化物的生成量來(lái)確定SRB含量,，該方法操作簡(jiǎn)單,，且檢測(cè)結(jié)果具有指導(dǎo)意義，但是檢測(cè)過(guò)程需在無(wú)氧條件下進(jìn)行,，且需要7-8h,。

Modern Water QuickChek SRB 檢測(cè)系統(tǒng)

QuickChek SRB 檢測(cè)系統(tǒng)是一種采用酶免疫方法進(jìn)行快速檢測(cè)SRB的設(shè)備。該檢測(cè)采用了高純度的抗體來(lái)探測(cè)APS,。本檢測(cè)試劑盒相比于細(xì)胞捕捉技術(shù)具有很多優(yōu)勢(shì),，比如快速，準(zhǔn)確等,，可在15-20min內(nèi)得到一個(gè)半定量的結(jié)果,。

該設(shè)備可以檢測(cè)固態(tài)，半固體樣品中的全部SRB含量,，包括了在一些標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)中無(wú)法存活的SRB,。測(cè)試結(jié)果不會(huì)被現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)常見(jiàn)的化學(xué)品或鹽類所干擾。

在固體或泥漿樣品由于懸浮固體含量較高,，難以使用傳統(tǒng)連續(xù)稀釋法和培養(yǎng)法進(jìn)行分析,。此類樣品可以使用quickchek檢測(cè)套裝進(jìn)行分析。QuickChek套裝中的化學(xué)破胞試劑可穿透固體顆粒并釋放出APS還原酶,，從而達(dá)到對(duì)生物膜,、沉積物、鐵銹,、污泥或泥漿中的SRB進(jìn)行定量檢測(cè)的目的,。QuickChek SRB支持固體檢測(cè)的特性尤其適合用于儲(chǔ)油罐底部SRB含量檢測(cè)。