色譜柱的使用壽命,，除了與所分析的樣品和流動相及使用頻率有關(guān)系外，zui主要的是與日常的維護(hù)密切相關(guān),。色譜柱的使用壽命主要是柱效和柱壓兩個指標(biāo)來衡量,，如果一支色譜柱柱效太低或柱壓太高，通常被認(rèn)為該色譜柱已經(jīng)結(jié)束,。因此,，延長色譜柱使用壽命的關(guān)鍵是，消除引起柱效下降和柱壓升高的因素,。以下是色譜柱的維護(hù)方法：

一,、流動相的PH應(yīng)在使用的范圍內(nèi)

　　流動相超過其PH范圍將會導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂,，使柱效下降,，使用壽命變短。由于流動相的PH 控制不當(dāng)而對色譜柱造成的損害,，通常很難是色譜柱恢復(fù),，因此必須認(rèn)真對待,，嚴(yán)格控制流動相的PH值。

二,、去除樣品和流動相中的固體顆粒

　　樣品和流動相中含有的固體顆粒物質(zhì)會堵塞色譜柱篩板,，篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高，而且也會引起柱效下降,，因?yàn)楹Y板的堵塞會引起液流不均,，導(dǎo)致色譜峰型拖尾、變寬,，從而使柱效下降,。因此，建議使用超純水和色譜純試劑,，在分析樣品前對樣品進(jìn)行針筒過濾,，流動相過0.45μm濾膜。

三,、使用保護(hù)柱或在線過濾器

　　樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能*消除固體顆粒物質(zhì),，因?yàn)楸玫哪p、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì),，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱,，堵塞篩板，導(dǎo)致柱壓升高,、柱效下降,。保護(hù)柱和在線過濾器上都有篩板，其孔徑與色譜柱孔徑相同,，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱,，有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大 比例,，因此,，除對樣品和流動相進(jìn)行過濾外，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過濾器,。

　　如果色譜柱柱壓升高是由于進(jìn)樣端篩板被堵引起的,，可選擇以下方式進(jìn)行補(bǔ)救：

　　1.先在色譜柱前加上保護(hù)柱或在線過濾器，然后用甲醇,、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min.

　　2.先在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過濾器,，然后反向使用。

四,、正確使用緩沖鹽

　　緩沖鹽通常易溶于水,，難溶于有機(jī)溶劑，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會使其析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,，使填料板結(jié),，柱壓上升；同時阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展,，使色譜柱的保留能力下降,，柱效降低。緩沖鹽析出后,，去除非常困難,，因此，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要,。

　 正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過濾，使用后要沖洗,。具體方法如下：

　　1.等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min,；使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0.2ml/min流速沖洗色譜柱過夜。

　　2.梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min,，再用該過渡流動相以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,，以避免梯度過程中緩沖鹽析出,。

　　注意：過渡流動相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動相相同，區(qū)別只是過渡流動相不含緩沖鹽,。

　　3.緩沖鹽析出的補(bǔ)救方法：

　　方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min

　　方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜,。

五、防止強(qiáng)保留物質(zhì)在色譜柱上存留

　　強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積,，對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為,，不僅引起峰型變寬、拖尾,，使柱效下降,，同時也會引起保留時間的變化，累積到一定程度時還會導(dǎo)致柱壓升高,。由于強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應(yīng),，需要一定的時間才會體現(xiàn)出來，但對許多藥品特別是復(fù)雜樣品而言,，很難判斷其是否是含有強(qiáng)保留物質(zhì),，因此要防止強(qiáng)保留物質(zhì)的累積，需要在每天的日常維護(hù)中用純甲醇或乙氰清洗色譜柱,。

　　清洗方法：

　　1.未使用緩沖鹽：每天分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后再用甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min。

　　2.使用過緩沖鹽：分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽，然后在用純甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min,。

　　3.補(bǔ)救方法：

　　水--乙氰--lv仿（或異丙醇）--乙氰--水

　　每一步以1.0ml/min流速反向沖洗色譜柱60min

                                       來源：科捷分析儀器