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直接滴定法測還原糖

來源:上海希言科學(xué)儀器有限公司   2018年04月16日 12:05  

1. 實(shí)驗(yàn)原理 

實(shí)驗(yàn)經(jīng)除去蛋白質(zhì)后,,在加熱條件下,以亞甲基藍(lán)為指示劑,,滴定標(biāo)定過的堿性酒石酸銅溶液(用還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定),,根據(jù)樣品液消耗體積計(jì)算還原糖含量。 

2. 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑 

硫酸銅,、亞甲基藍(lán)指示劑,、酒石酸鉀鈉、氫氧化鈉,、乙酸鋅,、冰乙酸、亞鐵氰hua鉀,、葡萄糖,、氫氧化鈉溶液(40g/L) 
堿性酒石酸銅甲液:稱取15g硫酸銅及0.05g亞甲藍(lán)加適量水溶解至1000ml 堿性酒石酸銅乙液:稱取50g酒石酸鉀鈉與75g氫氧化鈉,加適量水溶解,,再加4g亞鐵氰hua鉀,,*溶解后稀釋至1000ml,貯存于橡膠塞玻璃瓶中,。 鹽酸溶液:量取50ml鹽酸加水稀釋至100ml,。 
葡萄糖標(biāo)液:稱取1.0g干燥2h后的葡萄糖,加水溶解并加入5ml鹽酸,并以水稀釋到1000ml,,此溶液每毫克相當(dāng)于1.0mg葡萄糖,。 

3.儀器 

25ml滴定管、250 ml容量瓶,、150ml錐形瓶,、玻璃珠、 真空泵、電子天平,、可調(diào)電爐(帶石棉板) 
 

4.實(shí)驗(yàn)步驟 

4.1 樣品處理: 

一般食品是稱取粉碎后的樣品2.5~5g或吸取5~25g液體樣品,,置于250 ml容量瓶中,加50ml水,,搖勻,。加入5ml 乙酸鋅溶液及5ml亞鐵氰hua鉀溶液,加水至刻度,,混勻,。靜置30min,用干燥濾紙過濾,,棄去初濾液,,濾液備用。 

4.2標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液: 

吸取5.0g堿性酒石酸銅甲液及乙液,,于150ml錐形瓶中 加水10ml,加入玻璃珠兩粒,從滴定管滴加約9ml葡萄糖或其他還原糖標(biāo)液,,控制在2min內(nèi)加熱至沸,,趁熱以1滴/2s的速度繼續(xù)滴加葡萄糖或其他還原糖標(biāo)液至藍(lán)色剛好褪去,即為終點(diǎn),,記錄消耗體積,,平行測定3次并取平均值,計(jì)算每10ml酒石酸銅溶液(甲,、乙各5ml)相當(dāng)于多少葡萄糖或其他還原糖的質(zhì)量(mg),。 

4.3試樣溶液預(yù)測: 

吸取5.0g堿性酒石酸銅甲液及乙液,于150ml錐形瓶中 加水10ml,加入玻璃珠兩粒,,控制在2min內(nèi)加熱至沸,,保持沸騰以先快后慢的速度,從滴定管中滴加試樣溶液,,病保持溶液沸騰狀態(tài),,待溶液顏色變淺時(shí),以1滴/2秒的速度滴定,,直至藍(lán)色剛好褪去即為終點(diǎn),,記錄樣液消耗體積。

4.4樣品測定: 

吸取5.0g堿性酒石酸銅甲液及乙液,,于150ml錐形瓶中 加水10ml,加入玻璃珠兩粒,,從滴定管滴加比預(yù)測體積少1ml的試樣溶液至錐形瓶中,使在2min內(nèi)加熱至沸,,保持沸騰繼續(xù)以1滴/2秒的速度滴定,,直至藍(lán)色剛好褪去即為終
點(diǎn),記錄樣液消耗體積,平行測定3次,,得出平均消耗體積,。 

5.計(jì)算 
 

式中: 
 X—樣品中還原糖的含量(g/100g) 
V—測定用樣品時(shí)平均消耗溶液的體積(ml) m—試樣質(zhì)量(g) 
m1—堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于某種還原糖的質(zhì)量(mg)

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