毛細(xì)管色譜柱只有正確的安裝,才能保證發(fā)揮其*的性能和延長(zhǎng)使用壽命,。正確安裝請(qǐng)參考以下步驟。
步驟1:檢查氣體過(guò)濾器,、載氣,、進(jìn)樣墊和襯管等。 檢查氣體過(guò)濾器和進(jìn)樣墊,,保證輔助氣和檢測(cè)器的通氣暢通,,如果以前做過(guò)較臟樣品或活性較高的化合物,需要將進(jìn)樣口的襯管清洗或更換,。
步驟2:將螺母和密封墊裝在色譜柱上,,并將色譜柱兩端小心切平,切面要平滑整齊,。
步驟3:將色譜柱連接于進(jìn)樣口上,。 色譜柱在進(jìn)樣口中插入的深度應(yīng)根據(jù)所使用的GC儀器不同而定,正確合適的插入能zui大可能地保證試驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性,。通常,,色譜柱的入口應(yīng)保持在進(jìn)樣口的中下部,即處于進(jìn)樣針穿過(guò)隔墊*插入進(jìn)樣口后針尖與色譜柱入口相距1~2cm,,(具體的插入程度和方法參考所使用GC的隨機(jī)手冊(cè)),。
避免用力彎曲擠壓毛細(xì)管柱,并小心不要讓標(biāo)記牌等帶有鋒利邊緣的物品與毛細(xì)管柱接觸摩擦,以防毛細(xì)管柱斷裂受損,。
色譜柱正確插入進(jìn)樣口后,,將連接螺母擰上,擰緊后(用手?jǐn)Q不動(dòng)了)用扳手再多擰1/4—1/2圈,,保證安裝的密封程度,。不緊密的安裝,不僅會(huì)引起裝置的泄漏,,而且有可能對(duì)色譜柱造成*損壞,。
步驟4:接通載氣。 當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口接好后,,通入載氣,,調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速。
將色譜柱的出口端插入裝有已烷的樣口瓶中,,正常情況下可以看見(jiàn)瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡,。如果沒(méi)有氣泡就要重新檢查載氣裝置和流量控制器等是否設(shè)置正確,并檢查整個(gè)氣路有無(wú)泄漏,,待所有問(wèn)題解決后,,將色譜柱出口從瓶中取出,保證柱端口無(wú)溶劑殘留,,再進(jìn)行下一步的安裝,。
步驟5:將色譜柱連接于檢測(cè)器上。 色譜柱與檢測(cè)器的連接安裝和所需注意的事項(xiàng)和色譜柱與進(jìn)樣口連接大致相同,。如果在應(yīng)用中系統(tǒng)所使用的ECD或NPD等,,那么在老化色譜柱時(shí),應(yīng)該將色譜柱與檢測(cè)器斷開(kāi),,這樣檢測(cè)器可避免被污染,。
步驟6:確定載氣流量,再對(duì)色譜柱的安裝進(jìn)行檢查,。 注意:如果不通入載氣就對(duì)色譜柱進(jìn)行加熱,,會(huì)快速且*性的損壞色譜柱。
步驟7:色譜柱的老化,。 色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,,就可以對(duì)色譜柱進(jìn)行老化,對(duì)色譜柱加熱至一恒定溫度,,通常取其溫度上限,。特殊情況下,可加熱至高于zui高使用溫度10~20℃左右,,但是一定不能超過(guò)色譜柱的溫度上限否則極易損壞色譜柱,。當(dāng)達(dá)到老化溫度后,記錄并觀察基線,初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升,,在達(dá)到老化溫度后5~10min開(kāi)始下降,,并且會(huì)持續(xù)分鐘,當(dāng)達(dá)到一個(gè)固定的值后就會(huì)穩(wěn)定下來(lái),。如果在小時(shí)后基線仍無(wú)法穩(wěn)定,,或者在15~20分鐘后仍無(wú)明顯的下降趨勢(shì),那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染,。遇到這樣的情況,,應(yīng)立即將柱溫降到40℃以下,盡快地檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問(wèn)題,,如果還是繼續(xù)老化,,不僅對(duì)色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。
一般來(lái)說(shuō),,涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間較長(zhǎng),,而弱極性固定和較薄涂層的色譜柱所需時(shí)間較短。而PLOT色譜柱的老化方法有各不相同,,須按色譜柱供應(yīng)商提供的老化條件進(jìn)行老化,。
PLOT柱的老化步驟:
AT·Pora系列 250℃ 8h以上
Molecular Sieve(分子篩) 350℃ 12h
Alumina(氧化鋁) 200℃ 8h以上
由于水在氧化鋁和分子篩PLOT柱中的不可逆吸附,使得這兩種色譜柱容易發(fā)生保留行為漂移,,當(dāng)柱子分離過(guò)含有高水份樣品后,,需要將色譜柱重新老化,以除去固定相中吸附的水分,。
步驟8:設(shè)置確認(rèn)載氣流速,。 對(duì)于毛細(xì)管色譜柱使用載氣高純度氮?dú)饣驓錃猓d氣的純度大于99.95%,,而其中的含氧量越小越好。
如果您使用的是毛細(xì)管色譜柱,,那么依照載氣的平均線速度(cm/s),,而不是利用載氣流量(ml/min)來(lái)對(duì)載氣做出評(píng)價(jià),因?yàn)橹У挠?jì)算采用的是載氣平均線速度,。推薦平均線速度值:氮?dú)猓?0~20cm/s 氫氣:20~25cm/s
在載氣的管線中加入氣體過(guò)濾裝置不僅可以延長(zhǎng)色譜柱壽命,,而且很大程度地降低了背景噪音,建議安裝一個(gè)高容量脫氧管和一個(gè)載氣凈化器,。使用ECD系統(tǒng)時(shí),,能在其輔助氣路中也安裝一個(gè)脫氧管。
步驟9:柱流失檢測(cè),。 在色譜柱老化過(guò)程結(jié)束后,,采用程序升溫作一次空白試驗(yàn)(不進(jìn)樣),一般是以10℃/min從50℃升到zui高使用溫度,達(dá)到zui高使用溫度后保持10min,,這樣我們就會(huì)得到一張流失圖,。這些數(shù)值可以后作對(duì)比試驗(yàn),并且對(duì)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題的解決有幫助,。
在空白試驗(yàn)的色譜圖中,,不應(yīng)該有色譜峰出現(xiàn),如果出現(xiàn)了色譜峰,,通??赡苁菑倪M(jìn)樣口帶來(lái)的污染物。如果在正常的使用狀態(tài)下,,色譜柱的性能開(kāi)始下降,,基線的信號(hào)值會(huì)增高。另外,,如果在較低的溫度下,,基線信號(hào)值明顯大于初始值,那么有可能是色譜柱和系統(tǒng)有污染,。
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