1.離心概述

1.1離心原理

在離心力作用下,，混合物質(zhì)由于密度差異而沉積分離。離心時間由物質(zhì)的密度和施加的離心力決定

>密度越大,，越快沉降到達管底（密度=質(zhì)量/體積）

>離心力越大,，離心分離時間越短

離心分離按照應(yīng)用可分為離心沉降和離心過濾兩種

離心沉降 利用懸浮液(或乳濁液）密度不同的各組分在離心力場中迅速沉降分層的原理,，實現(xiàn)液-固或液-液(相)分離。日常實驗應(yīng)用有沉淀離心,、密度梯度離心,、等密度梯度離心等。

>沉淀離心 是離心機zui常見的應(yīng)用,，即通過離心使固體集聚沉淀在離心管底部從而與液體(上清液)分開,。在相分離的過程中。溶質(zhì)從而分散狀態(tài)或者溶液介質(zhì)中轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中(來進行化學(xué)/分子生物學(xué)分析),。

>等密度梯度離心 是指在離心力場下,，在密度梯度介質(zhì)中，顆粒移動到與它們各自的密度恰好相等的位置,，形成一系列密度區(qū),，從而使不同密度的物質(zhì)得到分離。

離心過濾 使懸浮液在離心力場下產(chǎn)生的離心壓力,，作用在過濾介質(zhì)上,，使液體通過過濾介質(zhì)成為濾液,，而固體顆粒被截留在過濾介質(zhì)表面，從而實現(xiàn)液-固分離,。例如超濾膜離心分離純化大分子物,。

1.2離心參數(shù)

對于一臺離心機來說比較重要的一下參數(shù):相對離心力/轉(zhuǎn)速、K因子,、離心時間,、溫度等

1.2.1 相對離心力/轉(zhuǎn)速

離心機通過離心力分離樣品，加速度和轉(zhuǎn)速是非常重要的參數(shù),。其中加速度是相對于地球表面的重力加速度g(9.81m/s²)而設(shè)置的,。離心效果主要由相對離心力(rcf)來衡量。相比于每分鐘轉(zhuǎn)速(rpm),，相對離心力更,。

相同轉(zhuǎn)速(rpm)的轉(zhuǎn)子，離心半徑不同可以形成不同的相對離心力(rcf),。

以MiniSpin plus和5430R為例,，同樣裝載1.5ml離心管，并以同樣轉(zhuǎn)速14000rpm離心,。根據(jù)上圖公式,，得到兩臺離心機的離心力分別為13100×g和20817×g，產(chǎn)生不同離心效果,。

由此可見,，轉(zhuǎn)速相同的情況下，離心半徑不同的轉(zhuǎn)子有不同的相對離心力,。

Tips:除了MiniSpin之外,，Eppendorf所有的離心機都可以實現(xiàn)離心力和轉(zhuǎn)速的自動轉(zhuǎn)換。

1.2.1 K因子和時間(t)

K因子主要由轉(zhuǎn)子決定,。在離心過程中,，它影響離心所需要的沉降時間(t)。一般而言,，它是離心管中沉降距離的一個量度標(biāo)準(zhǔn),。在離心管中，離心分離所需的時間(t)與沉降距離成正比,。K因子取決于轉(zhuǎn)子中離心管的角度和使用的離心管類型,。

K因子越小，意味著離心分離所需的時間越短,，K因子還受轉(zhuǎn)速的影響,，轉(zhuǎn)速越高，分離所 

需的時間越短

通過計算兩個轉(zhuǎn)子的K因子,，可以直接比較兩個轉(zhuǎn)子離心分離過程的相對轉(zhuǎn)速,，K因子越小表明離心分離所需時間越短,。

K因子和離心時間成正比:

如何選擇離心機

離心前請確保與參考實驗方案使用相同類型的轉(zhuǎn)子、相同的相對離心力,、離心溫度以及離心時間,。總的來說,，要想成功離心,，主要參數(shù)一下參考：

>樣品類型       >適配器類型

>離心耗材       >相對離心力

>離心機種類     >離心所需溫度

>轉(zhuǎn)子類型