以下是ELISA檢測試劑盒常見問題問答整理分析出來以方便各位了解：

（1）問：小鼠乙酰膽堿Elisa檢測試劑盒后期數(shù)據(jù)處理中空白的OD值有什么作用？

答：可以將標準品和樣本的OD值同時減去空白的值進行計算,，或者都不減,，保持同一水平就行。

（2）問：那我們算出來的ACH含量為什么出現(xiàn)負值？

答：說明個別樣本的濃度很低,當濃度接近第6個點的時候,直線方程就有可能計算出負值,。

（3）問：我兩個空白孔一個啥都不加,，一個加了后面的A液，B液還有終止液, 請問用哪一個,？

答:用加了A液,，B液還有終止液的那個更加準確,因為樣本都加過這些，可以排除相應的干擾,。

（4）問：我想問一下,，標準品濃度與標準品吸光度值之間是不是線性回歸？檢測出來的吸光度值很低一般都存在哪些原因,？大部分在0.08左右 ,？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa檢測試劑盒）

答：是線性回歸。檢測出來的值比較低 ,，樣本,、稀釋、操作等,，原因很多,，但只要在可操作范圍就行 。

（5）問：做出來的結果：標準品的吸光度呈線性回歸,，但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,，正常未予干預的大鼠血漿都基本沒有5-HT 表達，這是什么原因,？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa檢測試劑盒）

答：樣本,、稀釋,、室控和機器操作等,，原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近，好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測滴度,。

（6）問：Elisa檢測試劑盒的使用的方法是什么?。?/p>

答：采用雙抗夾心法 （目前暫行）

（7）問：一個孔需要多少量的血清,？

答：一個孔上樣量10-50微升,。

（8）問:未處理的樣本我需要郵寄多少的量？

答：每個孔需要100ul

（9）問：樣本怎么保存,？

答：當天要用的樣本保存4℃,，隔天樣本-20℃（近期一個月左右要用的樣本），長期保存樣本-70℃（一年或者更長時間多久都可以用）,，避免反復凍融,。

（10）問：EP管是什么管？

答：離心管。

（11）問：收集血清的時候用什么管,？

答：普通離心管即可,。

（12）問：96t可以檢測多少個樣本？48t可以檢測多少個樣本,？

答：96t標準的可以檢測85個樣本,，其他有10個標準品孔，1個空白對照,。96t單孔可以檢測90個樣,，7個標準品控 1個空白對照。48t標準的可以檢測37個樣本,，其他有10個標準品孔,，1個空白對照。48t單孔可以檢測40個樣本,，其他有7個標準品孔,，1個空白對照。

（13）問：標準的檢測85個樣本的和單孔相比,， 有什么好的地方嗎,？

答：標準的檢測又叫復孔檢測，標準的檢驗重復性測的結果好,，所以大家都叫復孔是標準的檢測,。

（14）問： 酶標板分次使用 剩下的建議怎么保持 ？

答：要是真的用不完或標本不多的情況下,。做點處理后：板條和板架都是可拆卸的,，可以再用之，前拆下4條放置錫箔袋或其他無污染的袋子,，放到冰箱 2-8度保存,。

（15）問：酶標包被版是酶標板嗎？

答：是的,。

（16）問：請問植物茉莉酸和水楊酸檢測的試劑盒,，我們提取擬南芥的，一般取樣量是多少,？

答：1-3g,。

（17）問：大鼠骨特異性堿性磷酸酶B（ALP-B）ELISA，大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5B）,，我發(fā)現(xiàn)試劑盒里缺少標準品稀釋液,，沒有它我的實驗無法進行，盒子里面有特殊稀釋液是用來稀釋樣品的,，但都沒有標準品稀釋液,，我的樣品已超出低檢測限，所以需要稀釋標準品才行嗎？

答：特殊稀釋液是用來稀釋標準品的,，特殊稀釋液一般情況不用當樣本濃度特別高是先用特殊稀釋液稀釋,，標準品需要再稀釋就也要用特殊稀釋液。

（18）問：測出來的標準曲線值前面幾盒都是0.98 才正常,，后面怎么變成0.93了,？

答：某個點偏離大可以去掉，保留5個點

（19）問：是不是空白對照就是什么都不加,？

答：不加樣本,，不加樣本稀釋液，不加酶標試劑 其他都可以加,。

（20）問：樣本稀釋液是配好的嗎,？

答：樣本稀釋液是配好的

（21）問：樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎？

答：可以,，直接加40ul就可以,。

（22）問：檢測的時候需要在操凈臺中操作嗎，還是在外面操作就可以了,？

答：要求不是很嚴格,，根據(jù)自己實驗室的設備而定，都可以,。

（23）問：人和肽素（copeptin）Elisa,，洗滌液是濃縮的，是一次配好,，還是現(xiàn)配現(xiàn)用,？

答：濃縮的，現(xiàn)配現(xiàn)用,。

（24）問：Elisa方法的不測人血小板第四因子里IgG抗體的滴度嗎,？

答：Elisa不測滴度的，熒光法可以測,。

（25）問：酶標板不平,，影響結果嗎,？

答：不影響結果的,。

（26）問：小鼠TNF-α ELISA 我的標本是細胞，我想要測的結果：抑制TNF的產(chǎn)生 空白組,、模型組,、藥物組，藥物組要成梯度抑制TNF的產(chǎn)生,、請問Elisa方法的可以測嗎,？

答：細胞可以測 但要分組，得到相應的梯度值，計算結果,。自己需要多查閱文獻 ,。

（27）問：人睪酮（T）Elisa,人雌三醇（E3）Elisa，是用什么酶標記的,？

答：辣根酶標記的 標本里不能加*

（28）問：我測植物水楊酸,，標本是煙草葉片怎么處理的？那上清液檢測SA時,，還需要用甲醇抽提嗎,？

答：稱取煙葉500mg，研磨成粉末狀,，加入5ml濃度為0.01mol,，PH值為7.4的PBS溶液，充分勻漿,，離心取上清液（3000-4000轉(zhuǎn),，15分鐘左右），分裝保存,，一般需要長期保存需放在-80度,，或者液氮中，備用,，不用加甲醇,。

（29）問：沒有做出標準曲線來，你知道什么原因嗎,？

答：操作肯定有問題,，做之前把標準品搖勻下。

（30）問：買同一個指標的幾個盒子,，用不用都做標準曲線,？

答：如果同一個指標買了3盒，建議每盒都做個標曲,。同一個盒子 ,，即使分幾次用，做一個標曲也行了,，因為數(shù)值不會偏差太大,，差不多。