以下是ELISA檢測(cè)試劑盒常見問題問答整理分析出來以方便各位了解：

（1）問：小鼠乙酰膽堿Elisa檢測(cè)試劑盒后期數(shù)據(jù)處理中空白的OD值有什么作用？

答：可以將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的OD值同時(shí)減去空白的值進(jìn)行計(jì)算,，或者都不減,，保持同一水平就行。

（2）問：那我們算出來的ACH含量為什么出現(xiàn)負(fù)值,？

答：說明個(gè)別樣本的濃度很低,當(dāng)濃度接近第6個(gè)點(diǎn)的時(shí)候,直線方程就有可能計(jì)算出負(fù)值,。

（3）問：我兩個(gè)空白孔一個(gè)啥都不加，一個(gè)加了后面的A液,，B液還有終止液, 請(qǐng)問用哪一個(gè),？

答:用加了A液，B液還有終止液的那個(gè)更加準(zhǔn)確,因?yàn)闃颖径技舆^這些,，可以排除相應(yīng)的干擾,。

（4）問：我想問一下，標(biāo)準(zhǔn)品濃度與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值之間是不是線性回歸,？檢測(cè)出來的吸光度值很低一般都存在哪些原因,？大部分在0.08左右 ,？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa檢測(cè)試劑盒）

答：是線性回歸。檢測(cè)出來的值比較低 ,，樣本,、稀釋、操作等,，原因很多,，但只要在可操作范圍就行 。

（5）問：做出來的結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度呈線性回歸,，但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,，正常未予干預(yù)的大鼠血漿都基本沒有5-HT 表達(dá)，這是什么原因,？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa檢測(cè)試劑盒）

答：樣本,、稀釋、室控和機(jī)器操作等,，原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近,，好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測(cè)滴度。

（6）問：Elisa檢測(cè)試劑盒的使用的方法是什么??？

答：采用雙抗夾心法 （目前暫行）

（7）問：一個(gè)孔需要多少量的血清？

答：一個(gè)孔上樣量10-50微升,。

（8）問:未處理的樣本我需要郵寄多少的量,？

答：每個(gè)孔需要100ul

（9）問：樣本怎么保存？

答：當(dāng)天要用的樣本保存4℃,，隔天樣本-20℃（近期一個(gè)月左右要用的樣本）,，長(zhǎng)期保存樣本-70℃（一年或者更長(zhǎng)時(shí)間多久都可以用），避免反復(fù)凍融,。

（10）問：EP管是什么管,？

答：離心管。

（11）問：收集血清的時(shí)候用什么管,？

答：普通離心管即可,。

（12）問：96t可以檢測(cè)多少個(gè)樣本？48t可以檢測(cè)多少個(gè)樣本,？

答：96t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測(cè)85個(gè)樣本,，其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對(duì)照,。96t單孔可以檢測(cè)90個(gè)樣,，7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品控 1個(gè)空白對(duì)照。48t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測(cè)37個(gè)樣本，其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,，1個(gè)空白對(duì)照,。48t單孔可以檢測(cè)40個(gè)樣本，其他有7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,，1個(gè)空白對(duì)照,。

（13）問：標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)85個(gè)樣本的和單孔相比， 有什么好的地方嗎,？

答：標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)又叫復(fù)孔檢測(cè),，標(biāo)準(zhǔn)的檢驗(yàn)重復(fù)性測(cè)的結(jié)果好，所以大家都叫復(fù)孔是標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè),。

（14）問： 酶標(biāo)板分次使用 剩下的建議怎么保持 ？

答：要是真的用不完或標(biāo)本不多的情況下,。做點(diǎn)處理后：板條和板架都是可拆卸的,，可以再用之，前拆下4條放置錫箔袋或其他無污染的袋子,，放到冰箱 2-8度保存,。

（15）問：酶標(biāo)包被版是酶標(biāo)板嗎？

答：是的,。

（16）問：請(qǐng)問植物茉莉酸和水楊酸檢測(cè)的試劑盒,，我們提取擬南芥的，一般取樣量是多少,？

答：1-3g,。

（17）問：大鼠骨特異性堿性磷酸酶B（ALP-B）ELISA，大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5B）,，我發(fā)現(xiàn)試劑盒里缺少標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,，沒有它我的實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行，盒子里面有特殊稀釋液是用來稀釋樣品的,，但都沒有標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,，我的樣品已超出低檢測(cè)限，所以需要稀釋標(biāo)準(zhǔn)品才行嗎,？

答：特殊稀釋液是用來稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的,，特殊稀釋液一般情況不用當(dāng)樣本濃度特別高是先用特殊稀釋液稀釋，標(biāo)準(zhǔn)品需要再稀釋就也要用特殊稀釋液,。

（18）問：測(cè)出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線值前面幾盒都是0.98 才正常,，后面怎么變成0.93了？

答：某個(gè)點(diǎn)偏離大可以去掉,，保留5個(gè)點(diǎn)

（19）問：是不是空白對(duì)照就是什么都不加,？

答：不加樣本，不加樣本稀釋液，不加酶標(biāo)試劑 其他都可以加,。

（20）問：樣本稀釋液是配好的嗎,？

答：樣本稀釋液是配好的

（21）問：樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎？

答：可以,，直接加40ul就可以,。

（22）問：檢測(cè)的時(shí)候需要在操凈臺(tái)中操作嗎，還是在外面操作就可以了,？

答：要求不是很嚴(yán)格,，根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備而定，都可以,。

（23）問：人和肽素（copeptin）Elisa,，洗滌液是濃縮的，是一次配好,，還是現(xiàn)配現(xiàn)用,？

答：濃縮的，現(xiàn)配現(xiàn)用,。

（24）問：Elisa方法的不測(cè)人血小板第四因子里IgG抗體的滴度嗎,？

答：Elisa不測(cè)滴度的，熒光法可以測(cè),。

（25）問：酶標(biāo)板不平,，影響結(jié)果嗎？

答：不影響結(jié)果的,。

（26）問：小鼠TNF-α ELISA 我的標(biāo)本是細(xì)胞,，我想要測(cè)的結(jié)果：抑制TNF的產(chǎn)生 空白組、模型組,、藥物組,，藥物組要成梯度抑制TNF的產(chǎn)生、請(qǐng)問Elisa方法的可以測(cè)嗎,？

答：細(xì)胞可以測(cè) 但要分組,，得到相應(yīng)的梯度值，計(jì)算結(jié)果,。自己需要多查閱文獻(xiàn) ,。

（27）問：人睪酮（T）Elisa,人雌三醇（E3）Elisa，是用什么酶標(biāo)記的,？

答：辣根酶標(biāo)記的 標(biāo)本里不能加*

（28）問：我測(cè)植物水楊酸,，標(biāo)本是煙草葉片怎么處理的？那上清液檢測(cè)SA時(shí),，還需要用甲醇抽提嗎,？

答：稱取煙葉500mg，研磨成粉末狀，加入5ml濃度為0.01mol,，PH值為7.4的PBS溶液,，充分勻漿，離心取上清液（3000-4000轉(zhuǎn),，15分鐘左右）,，分裝保存，一般需要長(zhǎng)期保存需放在-80度,，或者液氮中,，備用，不用加甲醇,。

（29）問：沒有做出標(biāo)準(zhǔn)曲線來,，你知道什么原因嗎？

答：操作肯定有問題,，做之前把標(biāo)準(zhǔn)品搖勻下,。

（30）問：買同一個(gè)指標(biāo)的幾個(gè)盒子，用不用都做標(biāo)準(zhǔn)曲線,？

答：如果同一個(gè)指標(biāo)買了3盒，建議每盒都做個(gè)標(biāo)曲,。同一個(gè)盒子 ,，即使分幾次用，做一個(gè)標(biāo)曲也行了,，因?yàn)閿?shù)值不會(huì)偏差太大,，差不多。