Q1：關(guān)于膜表面積和樣品量之間的關(guān)系有沒有經(jīng)驗法則,？

表面積與體積的比值取決于膜管扁平寬度,。如果有兩段相同長度的膜管，扁平寬度較小的膜管具有較高的比表面積,，而扁平寬度較大的膜管比表面積相對較小,，也就是說，前者的透析速率更快,。原因是扁平寬度較小的膜管,，溶質(zhì)的擴(kuò)散距離較短，溶質(zhì)之間通過膜孔的競爭也較小,。而扁平寬度大,，亦即溶質(zhì)到達(dá)膜表面的距離也較長，溶質(zhì)之間對膜孔的競爭也較大。一般而言,，比表面積越大,，透析越快。

Q2：如果膜兩側(cè)的摩爾滲透壓濃度相等,，但濃度梯度仍然存在,，物質(zhì)的通過效率如何？

大多數(shù)透析結(jié)束時膜兩側(cè)滲透壓相同,。透析過程是由膜管內(nèi)外兩側(cè)的濃度梯度驅(qū)動的,。如果滲透壓力有很大的差別，水會通過膜以平衡膜兩側(cè)的滲透壓,。如果過多的水通過膜,，透析膜管可能會隨水運動的方向增大或縮小，在體積增加到一定程度時,，有可能導(dǎo)致膜夾松動或膜管破裂,。

Q3：進(jìn)行超濾時，透析膜能承受多大的壓力,？

透析膜設(shè)計不適合用于壓力過濾,。在不影響截留分子量的前提下，zui大推薦壓力為1.5 psi,。

Q4：一般推薦使用哪種透析液（緩沖液）,？

生物分子必須保存在嚴(yán)格的pH值控制條件下，以穩(wěn)定其分子極性,。典型的透析緩沖液pH范圍為6-8,。以下為常用的幾種可以作為緩沖液的生化溶液：

• 水
• PBS
• TBS
• HEPES
• 氨基酸緩沖液

Q5：為什么使用微米vs道爾頓（MW）單位，怎么轉(zhuǎn)換,？

溶解的分子大小以分子量來定義,，單位為道爾頓，而顆粒和細(xì)胞大小常以直徑來定義,，由于分子的結(jié)構(gòu)和形態(tài)不同,，相同分子量的物質(zhì)，分子大小和形態(tài)可能相差較大,，兩者之間沒有的對應(yīng)關(guān)系,。出于這個原因，許多常見的生物材料都已特別定性,，并將大約的尺寸標(biāo)注在轉(zhuǎn)換表上作為估算的參考,，以用于透析、超濾和微濾應(yīng)用,。道爾頓與微米單位之間的轉(zhuǎn)化見圖,。

Q6：對于鹽濃度較高的樣品，*的透析方法是什么？

如果可能,，我們推薦使用低鹽濃度的緩沖液,。不推薦直接使用純DI水作為緩沖液，因為滲透壓力可能將水引入膜管,，使樣品體積膨脹并可能導(dǎo)致膜管破裂,。使用一系列濃度逐漸降低的溶液作為緩沖液可防止?jié)B透壓力導(dǎo)致的膜管膨脹。每次緩沖液置換,，可將溶質(zhì)濃度降低十分之一,，也就是說，透析一個5M NaCl的樣品,，可使用500 mM NaCl的緩沖液。

Q7：可以使用繩子結(jié)扎膜管,，而不使用膜夾嗎,？

我們不推薦使用繩子結(jié)扎膜管。因為繩結(jié)對膜管的損害具有很大的不確定性,，并且可能不能提供有效的密封,，而導(dǎo)致泄露。只有膜夾才能提供足夠的密封性,，從而保護(hù)樣品,。

Q8：透析膜管應(yīng)該剪多長？

對于每種膜管扁平寬度,，spectrumlabs提供相關(guān)的容積/長度比,，可方便計算透析樣品所需的膜管長度。如果扁平寬度為16 mm,，容積/長度比為0.79 ml/cm,，要容納5 ml的樣品，則需要大約6.5 cm長的膜管,。但是,，為保持樣品漂浮，一般需要在頂部空間預(yù)留10-20%膜長（約為1 cm）,。此外,，也需在兩端為膜夾各預(yù)留2 cm。所以總的膜管長度應(yīng)至少為11.5 cm,。

可根據(jù)以下公式計算膜管長度：

總長度=（樣品體積）/（容積/長度）+（額外的10-20%）+4 cm

根據(jù)樣品體積和扁平寬度,，計算所需的膜管長度。