氣泡對牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒實(shí)驗結(jié)果的影響
在做牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒實(shí)驗的過程中,加樣時難免會出現(xiàn)氣泡,。通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一,。在做實(shí)驗的過程中,有時為了打干凈槍頭里面的液體,,很容易產(chǎn)生氣泡,,那么氣泡對ELISA實(shí)驗結(jié)果會有什么影響呢?
1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一,。
2.包被時有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不*實(shí)際包被量下降--弱陽性甚至假陰性,。
3.封閉時有氣泡的話,,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,,假陽性,。
4.加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性。
5.加二抗時有氣泡的話,,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性),。
6.加顯色液時有氣泡的話---顯色不*。
7.加終止液時有氣泡的話(1,、不能*終止反應(yīng) 2,、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)
8.洗滌時有氣泡的話,,非特異性結(jié)合物不能*洗去,,做無用功。
避免方法:
1,、加樣時盡量靠近孔底(不要接觸孔底),,用力均勻,不要過快過猛,。
2,、牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒封閉時一定要加滿孔。
3,、洗滌時一定要加滿孔(重要),,氣泡會浮上來zui終驅(qū)除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干,。
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牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒
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