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液相色譜法的詳細介紹

來源:沃特世科技(上海)有限公司(Waters)   2017年09月08日 09:23  

       液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”,、“高分離度液相色譜”,、“近代柱色譜”等。液相色譜是色譜法的一個重要分支,,以液體為流動相,,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑,、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,,進入檢測器進行檢測,,從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學,、醫(yī)學,、工業(yè)、農(nóng)學,、商檢檢等學科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用,。

液相色譜法有“四高一廣”的特點:

①高壓:流動相為液體,流經(jīng)色譜柱時,,受到的阻力較大,,為了能迅速通過色譜柱,,必須對載液加高壓。

②高速:分析速度快,、載液流速快,,較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,,一般小于1小時。

③:分離效能高,??蛇x擇固定相和流動相以達到*分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍,。

④高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,,進樣量在μL數(shù)量級。

⑤應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用液相色譜分析,,特別是高沸點,、大分子、強極性,、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,,顯示出優(yōu)勢。

⑥柱子可反復(fù)使用:用一根柱子可分離不同化合物

⑦樣品量少,、容易回收:樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞,,可以收集單一組分或做制備。

此外液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用,、樣品不被破壞,、易回收等優(yōu)點,但也有缺點,,與氣相色譜相比各有所長,,相互補充。液相色譜的缺點是有“柱外效應(yīng)”,。在從進樣到檢測器之間,,除了柱子以外的任何死空間(進樣器、柱接頭,、連接管和檢測池等)中,,如果流動相的流型有變化,被分離物質(zhì)的任何擴散和滯留都會顯著地導致色譜峰的加寬,,柱效率降低,。液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。

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