菌落計(jì)數(shù)器廣泛用于食品、飲料,、藥品,、生物制品,、化妝品、衛(wèi)生用品,、飲用水,、生活污水、工業(yè)廢水,、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗(yàn),,那么如何操作和使用菌落計(jì)數(shù)器呢?上海旦鼎來為您講解菌落計(jì)數(shù)器的操作方法和流程,。
菌落總數(shù)的測定,,一般將被檢樣品制成幾個不同的10倍遞增稀釋液,然后從每個稀釋液中分別取出1mL置于滅菌平皿中與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合,,在一定溫度下,,培養(yǎng)一定時間后(一般為48小時),記錄每個平皿中形成的菌落數(shù)量,,依據(jù)稀釋倍數(shù),,計(jì)算出每克(或每ml)原始樣品中所含細(xì)菌菌落總數(shù)。
基本操作一般包括:樣品的稀釋--傾注平皿--培養(yǎng)48小時--計(jì)數(shù)報(bào)告,。
國內(nèi)外菌落總數(shù)測定方法基本一致,從檢樣處理,、稀釋,、傾注平皿到計(jì)數(shù)報(bào)告無何明顯不同,,只是在某些具體要求方面稍有差別,如有的國家在樣品稀釋和傾注培養(yǎng)進(jìn),,對吸管內(nèi)液體的流速,,稀釋液的振蕩幅度、時間和次數(shù)以及放置時間等均作了比較具體的規(guī)定,。
檢驗(yàn)方法參見:
GB4789.2-94《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定》
SN0168-92《中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)出口食品菌落計(jì)數(shù)》
1.操作方法:培養(yǎng)到時間后,,計(jì)數(shù)每個平板上的菌落數(shù)??捎萌庋塾^察,,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏,。在記下各平板的菌落總數(shù)后,,求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù),計(jì)算處原始樣品中每克(或每ml)中的菌落數(shù),,進(jìn)行報(bào)告,。
2.到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時間,應(yīng)立即計(jì)數(shù),。如果不能立即計(jì)數(shù),,應(yīng)將平板放置于0-4℃,但不得*過24h,。
3.計(jì)數(shù)時應(yīng)選取菌落數(shù)在30~300之間的平板(SN標(biāo)準(zhǔn)要求為25~250個菌落),,若有二個稀釋度均在30~300之間時,按國家標(biāo)準(zhǔn)方法要求應(yīng)以二者比值決定,,比值小于或等于2取平均數(shù),,比值大于2則其較小數(shù)字(有的規(guī)定不考慮其比值大小,均以平均數(shù)報(bào)告),。
4.若所有稀釋度均不在計(jì)數(shù)區(qū)間,。如均大于300,則取較為高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之,。如均小于30,,則以較為低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如菌落數(shù)有的大于300,,有的又小于30,,但均不在30~300之間,則應(yīng)以較為接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之,。如所有稀釋度均無菌落生長,,則應(yīng)按小于1乘以較為低稀釋倍數(shù)報(bào)告之。有的規(guī)定對上述幾種情況計(jì)算出的菌落數(shù)按估算值報(bào)告。
5.不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的二個平板的菌落數(shù)應(yīng)基本接近),,即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少,,稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,,則應(yīng)視為檢驗(yàn)中的差錯(有的食品有時可能出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,,如酸性飲料等),不應(yīng)作為檢樣計(jì)數(shù)報(bào)告的依據(jù),。
6.當(dāng)平板上有鏈狀菌落生長時,,如呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限,則應(yīng)作為一個菌落計(jì),,如存在有幾條不同來源的鏈,,則每條鏈均應(yīng)按一個菌落計(jì)算,不要把鏈上生長的每一個菌落分開計(jì)數(shù),。如有片狀菌落生長,,該平板一般不宜采用,如片狀菌落不到平板一半,,而另一半又分布均勻,,則可以半個平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。
7.當(dāng)計(jì)數(shù)平板內(nèi)的菌落數(shù)過多(即所有稀釋度均大于300時),,但分布很均勻,,可取平板的一半或1/4計(jì)數(shù)。再乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)作為該平板的菌落數(shù),。
8.菌落數(shù)的報(bào)告,,按國家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定菌落數(shù)在1~100時,按實(shí)有數(shù)字報(bào)告,,如大于100時,,則報(bào)告前面兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)按四舍五入計(jì)算,。固體檢樣以克(g)為單位報(bào)告,,液體檢樣以毫升(ml)為單位報(bào)告,表面涂擦則以平方厘米(cm2)報(bào)告,。
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