紫外分光光度計如何來測DNA濃度呢,?以下將由上海旦鼎技術人員為您詳細講解,,歡迎瀏覽以下詳細內(nèi)容!
將待測DNA溶液作適當稀釋,選用光程為0.5cm的石英比色杯,,在紫外分光光度計上測定OD260和OD280的值,,按以下公式計算DNA濃度。
DNA濃度(ng /µL)=OD260×50×稀釋倍數(shù)
當OD260/OD280< 1.8,,表示蛋白質(zhì)含量較高
當OD260/OD280> 2.0,,表示RNA含量較高
當OD260/OD280=1.8~2.0,表示DNA較純
TE緩沖液:10mM Tris-HCl(pH 8.0),;1mM EDTA(pH 8.0)
CTAB提取緩沖液:100mM Tris-HCl(pH=8.0),,20mM EDTA,,1.4M NaCl,,2%CTAB,2%ß-巰基乙醇
1×TBE緩沖液:Tris 10.8g,、硼酸5.5g,、EDTA(0.5M,pH8.0) 4mL,,加H2O至1000mL
10×上槽緩沖液:Tris108g,、硼酸55g、EDTA(1M,,pH8.0)20mL,,加H2O至1000mL,稀釋10倍使用
5×下槽緩沖液:Tris 54g,、無水NaAc 205g,、硼酸27.5g、EDTA(0.5M,,pH8.0)20mL,,加H2O定溶至1000mL,稀釋5倍使用Loading buffer:甲酰胺49mL,、EDTA(0.5M,,pH8.0)1mL、溴酚藍0.125g,、二甲苯氰0.125g,,混合備用
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