詳述熒光分光光度計(jì)測(cè)試步驟

應(yīng)如何正確使用熒光分光光度計(jì)來進(jìn)行測(cè)試呢,？以下將由上海旦鼎技術(shù)人員為您詳述：

熒光分光光度計(jì)詳細(xì)測(cè)試步驟

(一)樣品準(zhǔn)備

1.液體樣品根據(jù)用戶提供的技術(shù)指標(biāo),，檢查濃度范圍是否合適,，如果需要稀釋，則要考慮所需溶劑類型和稀釋倍數(shù),。

2.固體樣品均勻粉末,、片狀或具有光滑平面的塊狀樣品，均可直接測(cè)定,。

(二)操作步驟

1.開機(jī)：接通電源,，打開主機(jī)開關(guān)，點(diǎn)燃(打開)光源后,，根據(jù)說明書要求啟動(dòng)計(jì)算機(jī),。

2.檢測(cè)前準(zhǔn)備：參照儀器說明書,，在20天內(nèi)至少進(jìn)行一次激發(fā)校準(zhǔn)和發(fā)射校準(zhǔn)，檢測(cè)前儀器應(yīng)預(yù)熱,。

3.工作條件的選擇：環(huán)境溫度應(yīng)在20℃±5℃;相對(duì)濕度不大于70%;電源穩(wěn)定,，無磁場(chǎng)、電場(chǎng)干擾,。根據(jù)樣品的特性及熒光強(qiáng)度,，選擇合適的儀器工作條件(如狹縫、PM增益,、響應(yīng)時(shí)間等),。

4.基本測(cè)定

(1)熒光激發(fā)光譜測(cè)定

設(shè)置儀器參數(shù)，掃描發(fā)射波長(zhǎng),，找到maxλem,，以此為發(fā)射波長(zhǎng)，記錄發(fā)射強(qiáng)度作為激發(fā)波長(zhǎng)的函數(shù),，便得到激發(fā)光譜,。

(2)熒光發(fā)射光譜測(cè)定

設(shè)置儀器參數(shù)，掃描激發(fā)波長(zhǎng),，找到maxλex,，以此為激發(fā)波長(zhǎng)，記錄發(fā)射強(qiáng)度與發(fā)射波長(zhǎng)間的函數(shù)關(guān)系,，便得到熒光發(fā)射光譜,。

(3)差譜測(cè)定

設(shè)置儀器參數(shù)，選擇合適的工作方式,，測(cè)定背景溶液的發(fā)射光譜并儲(chǔ)存起來,，在一定的工作方式下，掃描樣品溶液的發(fā)射波長(zhǎng),，得到當(dāng)時(shí)的光度值和儲(chǔ)存的背景值之間的差示值,，即差譜。

(4)峰面積積分

選擇適當(dāng)?shù)墓ぷ鞣绞?，?duì)樣品溶液進(jìn)行積分操作,，即得到峰面積積分。

(5)熒光強(qiáng)度

選擇合適的測(cè)量參數(shù),，設(shè)置λex,、λem，采用定點(diǎn)讀數(shù)或掃描方式,，即可測(cè)得所選波長(zhǎng)處的熒光強(qiáng)度,。

(6)定量測(cè)定

配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在一定的測(cè)定條件下,，設(shè)置λex,、λem,，按照由稀至濃的次序，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度,，繪制熒光強(qiáng)度—濃度的工作曲線,，不改變儀器參數(shù)測(cè)定未知溶液的熒光強(qiáng)度，由工作曲線即可求出未知溶液的濃度,。

(三)分析結(jié)果的表述

1.熒光激發(fā)光譜,、發(fā)射光譜以及其他光譜由儀器控制電腦直接繪出。

2.峰面積積分,、熒光強(qiáng)度由儀器控制電腦計(jì)算顯示,。

3.定量測(cè)試：在相同的測(cè)定條件下，測(cè)定一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度,，繪制出熒光強(qiáng)度-濃度的工作曲線,。濃度未知的溶液的熒光強(qiáng)度測(cè)定后，由工作曲線求出該溶液的濃度,。 

熒光分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)

1.在實(shí)驗(yàn)開始前,，應(yīng)提前打開儀器預(yù)熱，并配制好所需的溶液,，對(duì)于已經(jīng)配制好的溶液,，在不用時(shí)放在4℃冰箱中保存,，放置時(shí)間*過一星期的溶液要重新配制,。

2.實(shí)驗(yàn)所用的樣品池是四面透光的石英池，拿取的時(shí)候用手指掐住池體的上角部,，不能接觸到四個(gè)面,，清洗樣品池后應(yīng)用擦鏡紙對(duì)其四個(gè)面進(jìn)行輕輕擦拭。

3.在測(cè)試樣品時(shí),，注意熒光強(qiáng)度范圍的設(shè)定不要太高,，以免測(cè)得的熒光強(qiáng)度*過儀器的測(cè)定上限。

4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,，要及時(shí)的清理臺(tái)面,，處理廢液，清洗和放置好樣品池,，將下次要用的溶液放回冰箱,，并且按規(guī)定登記實(shí)驗(yàn)記錄，養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣,。

通過以上介紹對(duì)于熒光分光光度計(jì)的測(cè)試步驟及使用注意事項(xiàng),，您是否了解了呢？如有不明之處,，歡迎隨時(shí)與我們,！