經驗分享：

1.原代細胞鋪満瓶底后棄原液,，PBS沖洗2次。

2.加入0.25%Trypsin-0.02%EDTA,量覆蓋瓶底即可,，室溫作用，鏡下觀察至組織塊周圍的細胞回縮,，立體感增強,。

3.棄去消化液，PBS輕漂一遍(目的是除去EDTA,，它對脆弱的原代細胞很不好)但不要用力搖晃，以免部分消化稍過的細胞流失,。

4.加入培養(yǎng)液吹打，不要產生氣泡,，對細胞有損,。

5.吸出2/3的懸液傳入新瓶。
6.向原瓶中余下的1/3細胞懸液中補加2/3的新培養(yǎng)液,，與未消化的組織塊繼續(xù)培養(yǎng),。

7. 24小時內新的細胞又從組織塊中爬出啦，等鋪滿后再如上所述做一次吧,。
 

注：

1.只有當原代培養(yǎng)時組織塊較多時才這樣做,，否則得不償失。

2.保留1/3的細胞是為了讓余下的組織塊在細胞間作用下迅速健康的生長,。

3.一瓶細胞以此法處理不要超過3次。