（1）波長校正：使用光電比色計(jì)或分光光度計(jì),，在更換光源燈、重新安裝,、搬運(yùn)或檢修后,，以及儀器工作不正常時，都要進(jìn)行波長校正,。就是正常工作的儀器,，每隔一個月也要檢查一次波長，必要時進(jìn)行校正,，這樣才能保證波長讀數(shù)與通過樣品的波長符合,，保證儀器的較為大靈敏度。方法常用譜釹濾光片校正法,，適用于721型儀可見光區(qū)的波長校正,，常以585nm或529nm處的吸收峰或T%為標(biāo)準(zhǔn)。鑒于721型儀器的出射光波長較寬,，不易將573nm和585nm的兩峰或兩谷分開,，校正時易產(chǎn)生誤差，故推薦用529nm處的峰或谷為標(biāo)準(zhǔn)來進(jìn)行波長校正,。校正時,，將儀器按要求預(yù)熱。要求電源電壓穩(wěn)定,。波長度盤置580nm處,，T%調(diào)至較為大,，在比色杯處放一白紙條，觀察是否有光強(qiáng)均勻,、邊緣無光暈或雜光的光斑,，如不符合要求，可調(diào)節(jié)燈泡位置使其符合要求,，是為波長校正的粗調(diào),。再把靈敏度扭置于“1”（較為低檔），波長度盤對準(zhǔn)529nm,，電表機(jī)械零點(diǎn)為零,，在光路空白時調(diào)T%為100%T，并反復(fù)查零點(diǎn)和100%T穩(wěn)定情況,。將譜釹濾光片插入光路,，慢慢旋轉(zhuǎn)波長度盤，找到透光率較為低的一點(diǎn)（向左右微旋波長度盤時,，該點(diǎn)透光率值均增加）,，這一點(diǎn)即為波長529nm。檢查波長度盤的指示值是不是529nm,，如指示值為534nm,，此時波長工誤差為5nm，*出規(guī)定（±1nm）必須進(jìn)行調(diào)整,。 

　　調(diào)整方法：將波長度盤對準(zhǔn)529nm，從光路取出譜釹濾光片,，光路空白時調(diào)電表指針到100%T,，再將譜釹濾光片插入光路。打開儀器左側(cè)小蓋板,，找到波長校正螺絲（3個中左側(cè)柄長的一個）,；反時針方向微微調(diào)節(jié)（負(fù)誤差時順時針方向），使電表指針的指示T%為較為低,。反復(fù)檢查波長誤差情況,，直到符合儀器技術(shù)指標(biāo)為止。蓋好左側(cè)小蓋板,，校正結(jié)束,。 

　　有些儀器如島津UV-260型雙光束分光光度計(jì)，可使用氫燈或置譜釹濾光片于測定比色槽內(nèi),，編入濾工掃描程序后,，儀器即可自動地在一定波長范圍內(nèi)進(jìn)行波長校正。分光光度儀的光學(xué)系統(tǒng)密封在一個單元組件內(nèi),，若發(fā)生故障,，波長不準(zhǔn),，常須請制造商派專人修理。其它尚有譜線校正法,、干涉濾光片校正法和有色溶液校正法等,，可參考有關(guān)資料。 

　?。?）線性檢查：線性檢查包括儀器線性及測定方法線性兩個方面的檢查,。線性誤差表現(xiàn)為溶液的濃度與吸光度不成線性關(guān)系，出現(xiàn)正偏離或負(fù)偏離的現(xiàn)象,。這種偏離,，按比耳定律的現(xiàn)象來自兩個方面：一是溶液本身不符合比耳定律，這種現(xiàn)象叫做化學(xué)偏離,；二是儀器本身各種因素的影響,，使吸光度測定值與濃度之間不成線性關(guān)系，這種現(xiàn)象叫儀器偏離,。此處研究的是后者,。儀器偏離的因素很多，如雜光,、有限帶寬,、檢測器噪聲、環(huán)境條件變化,、波長的變動,、比色杯的誤差、輻射光的非平行性,、檢測器本身的非線性等,。 

　　儀器線性檢查常用一種在一定波長及一定濃度范圍內(nèi)確知其服從比耳定律的有色物質(zhì)，配成不同濃度的溶液,，來檢查儀器本身是否能如實(shí)地反映有色物質(zhì)的濃度變化,。這種檢查方法與任何被測物質(zhì)呈色反應(yīng)等方法學(xué)上的問題無關(guān)。用測得的吸光度對濃度作圖,，在理想情況下應(yīng)是一條直線,。常用的方法是用0.8、1.6,、2.4,、4.0mg/L伊文藍(lán)濃度系列來檢查，波長用610nm,。 

　?。?）雜光（散光）檢查：在吸光度測定中，凡檢測器感受到的不需要的輻射都稱為雜光。雜光對吸光度測定法的準(zhǔn)確性有嚴(yán)重的影響,，但卻往往被忽視,。雜光的來源有：①儀器本身的原因，如單色器的設(shè)計(jì),、光源的光譜分布,、光學(xué)原件的老化程度、波帶寬度以及儀器內(nèi)部的反射及散射等,；②室內(nèi)光線過強(qiáng)而漏入儀器,，儀器暗室蓋不嚴(yán)；③樣品本身的原因,，如樣品有無熒光,、樣品的散射能力強(qiáng)弱等。 

　　雜光檢測方法：①紫外光區(qū)的雜光監(jiān)測可用10±0.1g/L的碘化na溶液,，在240nm處測定的吸光度應(yīng)大于2.00,。此外，也可用12g/L的氯化家溶液,，在220nm處測其透光度,，即為雜光量，一般應(yīng)小于1%T,。以上測定均用石英杯,，以蒸餾水校零。②在可見光區(qū)可使用譜釹濾光片或硫酸鎳法檢查,。先用譜釹濾片校正波長,，然后用黑紙片擋住比色杯光路（進(jìn)口儀器帶有比色杯樣黑色標(biāo)柱）之后調(diào)整0%T，再用空氣做空白調(diào)100%T,。插入譜釹濾光片,，在585nm處測定，其測定值即為雜光水平,。 

　　（4）比色杯的質(zhì)量檢查：比色杯一般由玻璃,、石英或熒石制成,，光徑1.0或0.5cm,光線通過時有一部分光為空氣與玻璃接觸面的反射而損失（4%），另一部分（很少）為玻璃吸收,。比色杯的質(zhì)量除其原料外,，再就是玻璃的厚度均勻，上下一致,，各杯彼此相配,。廠家多以四個一套供應(yīng)，且杯口上部外面標(biāo)有箭頭，箭頭對光源側(cè)使用,。盡管如此,，在使用前還是應(yīng)作質(zhì)量檢查。常用伊文藍(lán)法：將一定量的2.0mg/L的伊文藍(lán)溶液注入比色杯中,，比色杯內(nèi)液面應(yīng)相等,。用一個比色杯作標(biāo)準(zhǔn)，用紅色濾光片（波長600～610nm）,，用水校零后將此杯的讀數(shù)準(zhǔn)確調(diào)至50%T,，接著讀取其余杯的透光度。透光度相差在±0.5%T范圍內(nèi)者為合格,。 

　?。?）重復(fù)性檢查：在波長、工作狀態(tài),、電源電壓,、比色杯配套等合格的前提下，進(jìn)行重復(fù)檢查,。在用交流電源供電時,，儀器對一種溶液重復(fù)測定的讀數(shù)值差應(yīng)小于或等于標(biāo)尺上限值的1%。試驗(yàn)方法：將分析純重絡(luò)酸鉀于120～150攝氏度烘干2小時,，干燥器中冷卻,。精稱509.1mg于1000ml容量瓶中，以蒸餾水溶解并加至刻度,，混勻（此液180mg/L鉻）,。就用液為30、60,、180mg鉻/L,。取波長440nm，將應(yīng)用液各濃度管連續(xù)測3～5次,，各濃度管中較為大誤差小于1%T為合格,。 

　　（6）靈敏度檢查：將重鉻酸鉀液配制成30和32.5mg鉻/L及120和122.5mg/L鉻的4種應(yīng)用液（濃度差兩組各為2.5mg/L鉻）,。波長440nm,，以水校零點(diǎn)，將上述應(yīng)用液連續(xù)測3次吸光度,，兩組2.5mg/L鉻濃度差的吸光度值差都不小于0.01為合格,。