在正相色譜中,,一般采用極性鍵合固定相,硅膠表面鍵合的是極性的有機(jī)基團(tuán),,鍵合相的名稱由鍵合上去的基團(tuán)而定,。zui常用的有氰基(-CN),、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)鍵合相,。流動(dòng)相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機(jī)溶劑,,如烴類(lèi)溶劑,或其中加入一定量的極性溶劑(,、醇,、乙腈等),以調(diào)節(jié)流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度,。通常用于分離極性化合物,。一般認(rèn)為正相色譜的分離機(jī)制屬于分配色譜。組分的分配比K值,,隨其極性的增加而增大,,但隨流動(dòng)相中極性調(diào)節(jié)劑的極性增大(或濃度增大)而降低。同時(shí),,極性鍵合相的極性越大,,組分的保留值越大。該法主要用于分離異構(gòu)體,,極性不同的化合物,,特別是用來(lái)分離不同類(lèi)型的化合物?! ≡诜聪嗌V中,,一般采用非極性鍵合固定相,如硅膠-C18H37(簡(jiǎn)稱ODS或C18)硅膠-苯基等,,用強(qiáng)極性的溶劑為流動(dòng)相,,如甲醇/水,乙腈/水,,水和無(wú)機(jī)鹽的緩沖液等,。 正相色譜和反相色譜的區(qū)別: 本質(zhì)上是填料(固定相)的不同,正相色譜柱填料極性強(qiáng),洗脫順序由弱到強(qiáng);反相色譜柱填料極性弱,,洗脫順序由強(qiáng)到弱,?! ?、正相色譜 正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其他具有極性官能團(tuán)胺基團(tuán),,如(NH2,,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料,。 由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他極性基團(tuán)極性較強(qiáng),,因此,分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小,,即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱,。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,如正已烷(Hexane),,(Chloroform),,二氯甲烷(Methylene Chloride)等,?! ?、反相色譜 反相色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),,表面鍵合有極性相對(duì)較弱官能團(tuán)的鍵合相,。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),通常為水,、緩沖液與甲醇,、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組分zui先被沖洗出,,而極性弱的組分會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留,。 常用的反相填料有:C18(ODS),、C8(MOS),、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等,?! ”本﹪?guó)譜科技有限公司專業(yè)生產(chǎn):紫外分析儀、三用紫外分析儀,、暗箱式紫外分析儀,、暗箱三用紫外分析儀、暗箱紫外分析儀,、手提式紫外分析儀,、三用紫外分析儀暗箱式、紫外檢測(cè)儀,、部分收集器,、恒流泵,、蠕動(dòng)泵、凝膠成像系統(tǒng),、凝膠成像分析系統(tǒng),、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀,、旋渦混合器,、漩渦混合器、玻璃層析柱,、梯度混合器,、梯度混合儀、核酸蛋白檢測(cè)儀,、玻璃層析柱,、熒光增白劑測(cè)定儀、餾分收集器,、切膠儀,、藍(lán)光切膠儀、層析系統(tǒng)等產(chǎn)品,。咨詢
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