近年來(lái),，在對(duì)外出口畜禽食用產(chǎn)品時(shí),，對(duì)氯霉素殘留的檢測(cè)成為*的檢測(cè)指標(biāo)。國(guó)外一般要求畜禽食用產(chǎn)品中氯霉素不得超過(guò)1 ng／ml,，這對(duì)檢測(cè)手段的靈敏度提出了很高的要求,。目前我國(guó)國(guó)內(nèi)常用的檢測(cè)氯霉素藥殘的方法是使用液相法或氣相色譜法來(lái)對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，但這種檢測(cè)方法對(duì)樣品的處理比較復(fù)雜,，對(duì)實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)要求很高,，不利于在基層生產(chǎn)單位推廣應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)酶聯(lián)免疫吸附（ELIsA）借助于氯霉素殘留快速檢測(cè)試劑盒對(duì)雞肉組織殘留的氯霉素進(jìn)行檢測(cè),，處理簡(jiǎn)單,，操作步驟簡(jiǎn)便，可以快速有效地測(cè)定出肉品中的氯霉素殘留量,，其對(duì)氯霉素檢測(cè)的靈敏度可以達(dá)到
0．03 ng／ml的水平,。
1 材料
1．1 被檢樣品市場(chǎng)上隨機(jī)抽取的雞肉樣品，共92份,。
1．2 快速檢測(cè)試劑盒購(gòu)自合肥艾本森科學(xué)儀器有限公司,，美國(guó)Neogen公司生產(chǎn)，其組成為：（1）酶標(biāo)板,，氯霉素抗體包被,；（2）氯霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液；（3）酶標(biāo)結(jié)合物,；（4）酶標(biāo)結(jié)合物稀釋液,；（5）底物溶液；（6）
反應(yīng)終止液,；（7）標(biāo)樣／試樣稀釋液,；（8）清洗液,。以上各試劑4"C保存,，使用時(shí)回升至室溫,。MicBio-II酶標(biāo)板恒溫振蕩器，ABSON公司生產(chǎn),，
2 檢測(cè)方法
2．1 肉樣的處理方法（1）從被檢測(cè)的肉樣中取5 g樣品放入研缽中研磨成肉漿,，用量筒量取20 ml PBS
緩沖液（pH7．2）倒入肉漿中，然后將其倒入5mI大離心管中,。（2）將離心管在震蕩器上劇烈震蕩1 min,，使PBS緩沖液充分發(fā)揮作用。（3）在15℃的條件下以3 000轉(zhuǎn)／min,，離心15 min,。（4）離心后取0．2 ml上
層液用0．2 ml標(biāo)樣／試樣稀釋液稀釋。
2．2 檢測(cè)程序按照1：100稀釋酶標(biāo)結(jié)合物,。用移液管移取100 uL經(jīng)過(guò)稀釋的氯霉素標(biāo)準(zhǔn)液或樣品到相應(yīng)的微量滴定板孔中,，每孔中再加入50uL經(jīng)過(guò)稀釋的酶標(biāo)結(jié)合物。蓋上塑料膜后,，將酶標(biāo)板放入MicBio-II酶標(biāo)板恒溫振蕩器,，溫育120 min。洗板3次：向每個(gè)孔中加入300uL清洗液,，倒掉孔中的溶液,，然后在紙巾上拍擊酶標(biāo)板，重復(fù)以上步驟3次（如果沖洗不*會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果）,。向反應(yīng)孔中加入100 uL底物溶液,，進(jìn)行顯色反應(yīng)。讓反應(yīng)在室溫下暗處充分進(jìn)行30 min,。到時(shí)間后向反應(yīng)孔中加入100uL 1 M 的硫酸（反應(yīng)終止液）,，顏色由蘭色變成黃色。充分混勻后,，用酶標(biāo)儀在450 nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)吸光度（OD值）,。顏色在30 min內(nèi)穩(wěn)定。
3 結(jié)果
根據(jù)酶標(biāo)儀測(cè)定數(shù)據(jù),，將各樣品吸光度與氯霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度對(duì)比,，有20個(gè)樣品氯霉素含量在低
于0．5ng／g，有28個(gè)肉樣氯霉素含量在0．5～1．0ng／g之間,，有l(wèi)8個(gè)肉樣氯霉素含量在1～5ng／g之間,，有16個(gè)肉樣氯霉素含量在5～10ng／g之間有，7個(gè)肉樣氯霉素含量在10～50ng／g之間,，有3個(gè)肉樣的氯霉素含量大于50ng／g,，被檢92份雞肉樣品中47．83％的樣品氯霉素含量超標(biāo)（≥1 ng/g）,。
4 討論
氯霉素是一種廣譜抗生索，具有較強(qiáng)的抗菌殺菌作用,，由于價(jià)格比較便宜且治療效果比較明顯,，過(guò)去在畜禽養(yǎng)殖中被廣泛應(yīng)用。但食品中氯霉素對(duì)人體的縫康會(huì)造成嚴(yán)重的影響,，如再生障礙性貧血及粒狀細(xì)胞缺乏癥,，新生兒、早產(chǎn)兒灰嬰綜合征等,。因此,，聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織／世界衛(wèi)生組織食品添加劑專(zhuān)家委員會(huì)建議禁止此藥使用于食用動(dòng)物，美國(guó),、加拿大以及歐共體各國(guó)已嚴(yán)格控制將其用于食用動(dòng)物,。由于歷史的原因，目前我國(guó)應(yīng)用含有氯霉素成分的藥物仍不在少數(shù),。為了維護(hù)人體健康,，擴(kuò)大我國(guó)的肉制品外貿(mào)出口，*解決氯霉素在畜禽肉制品以及水產(chǎn)品中的殘留問(wèn)題,，除用藥,、制定動(dòng)物的停藥期外，也需要加強(qiáng)檢測(cè)研究,。肉類(lèi)產(chǎn)品巾微生物檢測(cè)法,，檢出氯霉素的zui低濃度為0．25～5．00 ng／ml。氣相或液相色譜的測(cè)定靈敏度雖能達(dá)到10 n g／ml,，但其對(duì)樣品的處理比較復(fù)雜,，對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員的要求很高，穩(wěn)定性與重復(fù)性均比較差,，不利于在基層生產(chǎn)單位推廣應(yīng)用,。應(yīng)用ELISA法檢測(cè)氯霉素殘留的靈敏度可達(dá)0．03 ng／ml的水平，是常規(guī)方法的數(shù)百倍,，而且操作簡(jiǎn)便,，檢測(cè)迅速。本方法不僅可用于各種肉制品中氯霉素殘留的檢測(cè),，而且可以用來(lái)檢測(cè)牛奶,、蜂蜜、奶粉等,，且結(jié)果穩(wěn)定,，重復(fù)性好，值得推廣應(yīng)用,。