一,、液固吸附色譜法（LSC）      

 流動相為液體,，固定相為固體吸附劑,。

1,、分離機制：利用溶質分子占據(jù)固定相表面吸附活性中心能力差異； 

分離前提：K不等或k不等,；

2,、固定相：與LC比，固定相粒徑不同（<10μm）,； 

3,、流動相：底劑（烷烴）+有機極性調節(jié)劑。

4．影響K的因素：

與固定相性質和流動相性質有關,；

溶質分子極性↑,，洗脫能力↓,，k↑，tR↑,；

溶劑系統(tǒng)極性↑,，洗脫能力↑，k↓,，tR↓,；

注：調節(jié)溶劑極性，可以控制組分的保留時間,；

5,、出柱順序：強極性組分后出柱，弱極性組分先出柱,；

6,、硅膠吸水量↑，LSC→LLC

硅膠含水量較小,，吸附色譜,，硅膠極性較大；

硅膠含水量>17% ,，分配色譜,，硅膠失活→載體；

吸附的水→固定液

二,、液-液分配色譜法（LLC）

1,、分離機制：利用組分在兩相中溶解度的差異

2、固定相：載體+固定液（物理或機械涂漬法）

缺點：

系統(tǒng)內部壓力大,，易流失,，不實用

固定液-極性→NLLC

固定液-非極性→RLLC

3、①正相色譜-固定液極性>流動相極性（NLLC）

極性小的組分先出柱,，極性大的組分后出柱：適于分離極性組分,；

②反相色譜-固定液極性<流動相極性（RLLC）

極性大的組分先出柱，極性小的組分后出柱：適于分離非極性組分,；

三,、化學鍵合相色譜法（BPC）

1、化學鍵合相 

（1）分離機制：分配+吸附（以LLC為基礎）,；

（2）特點：不易流失,；熱穩(wěn)定性好,；化學性能好,；載樣量大；適于梯度洗脫,；

2,、反相鍵合相色譜

（1）分離機制：疏溶劑理論,； 

正相-流動相與溶質排斥力強，作用時間↑,，K↑,，組分tR↑；

反相-流動相與溶質排斥力弱,，作用時間↓,，K↓，組分tR↓,；

（2）固定相：極性小的烷基鍵合相,；

C8柱，C18柱（ODS柱-HPLC約80%問題）,；

（3）流動相：

極性大的甲醇-水或乙腈-水,；

流動相極性>固定相極性；

底劑+有機調節(jié)劑（極性調節(jié)劑）,；

例：水+甲醇,，乙腈，THF,；

（4）流動相極性與k的關系：流動相極性↑,，洗脫能力↓，k↑,，組分tR↑

（5）出柱順序：極性大的組分先出柱,；極性小的組分后出柱；

（6）適用：非極性~中等極性組分（HPLC 80%問題）

3,、正相鍵合相色譜

(1)分離機制：溶質分子與固定相之間定向作用力,、誘導力、或氫鍵作用力

(2)固定相：極性大的氰基或氨基鍵合相,；

(3)流動相：極性?。ㄍ琇SC）；底劑+有機極性調節(jié)劑

(4)流動相極性與K的關系：流動相極性↑,，洗脫能力↑,，組分tR↓，k↓,；

(5)出柱順序：結構相近組分,，極性小的組分先出柱，極性大的組分后出柱,；

(6)適用：氰基鍵合相與硅膠的柱選擇性相似（極性稍?。蛛x物質也相似；氨基鍵合相與硅膠性質差別大,，堿性,，分析極性大物質、糖類等,；

4,、離子對色譜和離子抑制色譜

反相離子對色譜法（IPC或PIC） 

反相色譜中，在極性流動相中加入離子對試劑,，使被測組分與其中的反離子形成中性離子對,，增加K和tR，以改善分離,；

(1)離子對試劑：烷基磺酸鈉→分析堿,，四丁基季胺鹽→分析酸

(2)影響K的因素:

a．與m的極性有關（同反相色譜）；

b．與R的鏈長有關：R↑長,，極性↓小,，tR↑，k↑,；

(3)適用：

較強的有機酸,、堿；反相離子抑制色譜,；

在反相色譜中,，通過加入緩沖溶液調節(jié)流動相pH值，抑制,；

組分解離,，增加其K和tR，以達到改善分離目的,；

1）離子抑制劑：弱酸,、弱堿性物質； pH一定的緩沖溶液,；

2）K的影響因素：與流動相極性有關,，還與pH值有關；

選擇流動相：應同時考慮極性及pH值,； 

酸性物質-加入酸HAc,，tR↑，K↑,； 

堿性物質-加入堿NH3·H2O,，tR↑，K↑,；  

調節(jié)pH范圍：3.0~8.0,；pH>8.0破壞鍵合相與載體的結合；pH<3.0腐蝕柱子；

3）適用：

極弱酸堿物質,；pH=3~7弱酸,；pH=7~8弱堿,；兩性化合物,。

（內容來源衡天力儀器網(wǎng)）