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牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒避免過失的技巧

來源:上海谷研生物化學研究所   2017年05月25日 14:26  

*:牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒評估試劑的實用性,試劑的穩(wěn)定與否,,對準確率的高低到頭重要,。在試劑啟用前,應進行陰,、陽對照及樣品反復比照試驗,,判定試劑符合要求后方可使用。
第二:操作前仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作,。不同批號的試劑不可混用,。值得改進的地方,反復試驗確定成立后才能改進,,比如洗板次數(shù)的掌握等,。
第三:加樣要準確、快速,。加樣不準確,,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結(jié)果,。另外,,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應慎重,。要求在一定時間內(nèi)加樣完畢的實驗,,如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,,而且試劑長時間暴露在外,,尤其室溫過高時,保存期會縮短甚至失效,。
第四:檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗,。能熟練操作實驗儀器、器械,,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,,牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。
第五:使用校對過的微量移液器,,排除自然誤差,。移液器準確與否對定量檢測尤為重要
第六:嚴格掌握顯色時間,顯色時間過短,,加入終止液反應終止后,,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性,。超過顯色要求時間后顯色,,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關(guān),。加顯色劑后立即顯色,,不可報陽性,這可能是本底顯色的結(jié)果,。
第七:洗滌*,,洗板不*,,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。另外,,洗滌液要新鮮,,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,,也可能出現(xiàn)假陽性,。
第八:牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒嚴控反應時間,反應時間過長,,酶失活,;反應時間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,,容易洗掉,都可能造成假陰性,。

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