液相色譜分析有氣泡,？這樣來解決!

在操作液相色譜時,，有沒有為老是出現(xiàn)氣泡而崩潰？有沒有為超聲波震蕩了一個小時,，流動相還出現(xiàn)氣泡,，而暈倒？有沒有為天氣晴好的時候沒出現(xiàn)氣泡,，陰天、下雨天,，同一瓶,，出現(xiàn)了氣泡，而對自己的工作失去信心,？

在操作液相色譜時,，流動相出現(xiàn)氣泡，那整個工作就沒法進行了,。

超聲波震蕩了一個小時的流動相,，為什么天氣晴好的時候沒出現(xiàn)氣泡，陰天,、下雨天就會出現(xiàn),；是因為陰天、下雨天空氣氣壓下降,，引起溶在流動相中的空氣過飽和（晴天時氣壓高還沒飽和）,，當高壓泵抽取流動相時，空氣析出,，產(chǎn)生了氣泡,。

超聲波震蕩了一個小時的流動相,，為什么里面還有空氣呢？這是由于在常壓下震蕩,，驅(qū)趕空氣效果不行,。

如果把裝流動相的瓶子進行抽真空，同時進行超聲波震蕩,，效果會怎么樣呢,？效果非常好，只要1min,，流動相中的空氣差不多沒了,；經(jīng)過這樣驅(qū)逐空氣的流動相，陰天,、下雨天使用也不會出現(xiàn)氣泡了,；而且省時，不用動不動半小時,、一小時超聲波震蕩,；并且效果非常好。

由于氣泡的存在,，會造成色譜圖上出現(xiàn)尖銳的噪聲峰,，嚴重時會造成分析靈敏度下降；氣泡變大進入流路或色譜柱時會使流動相的流速變慢或不穩(wěn)定,，使基線起伏,。

造成上述現(xiàn)象的主要原因有三條：

一是流動相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡；

二是系統(tǒng)開始工作時未能將流路中的空氣驅(qū)趕干凈,；

三是在注入樣品時不注意混入了空氣,。

而液相色譜儀在使用中，整個液路系統(tǒng)有兩個地方易產(chǎn)生氣泡,！

1,、泵頭吸液白管;2、檢測口流通池,。 

氣泡產(chǎn)生的原因大多數(shù)是因為：

溫度上升,，壓力下降！溫度上升或柱溫上升,，當接近試劑沸點時,，試劑汽化產(chǎn)生氣泡，試劑中已含微小氣泡,，因加熱變大而產(chǎn)生氣泡,。

壓力下降產(chǎn)生氣泡，流動相中一直包含微小氣泡，無論超聲過濾,，均不能池底去掉它,，那么當壓力下降時，微小氣泡將長大,，且多個小氣泡易聚集成大氣泡,，而影響正常實驗。

氣泡產(chǎn)生原因及解決辦法:

一,、泵頭及吸液白管,。

1、泵頭：泵頭是壓力變化zui劇烈的地方,，也是zui易產(chǎn)生氣泡的地方,，泵頭靠負壓而吸液，而負壓必然使流動相中的小氣泡長大,，當泵腔變正壓時,，已長大的氣泡未必能全部變小流入后續(xù)液路，則泵腔內(nèi)將積存氣泡,，從而影響吸液精度,，鑒于此，泵頭上專門設(shè)計了排氣閥,，便于泵頭排氣,，觀察柱壓穩(wěn)定了說明泵頭排氣成功。

2,、吸液白管長氣泡,。

a、吸液白管接觸空氣部位漏氣,，產(chǎn)生可見氣泡,，吸液白管是常壓和負壓交臂變化部位，其漏表現(xiàn)為大氣進入白管內(nèi),，而不易見到管內(nèi)液體漏出。

處理方法：更換白管,。

b,、濾頭堵：濾頭堵使得液體流入濾頭的速度下降，泵強制吸液而產(chǎn)生真空氣泡,。

判斷：拔掉濾頭不再長氣泡則是濾頭堵,。

處理：A、30%硝酸水液超洗濾頭,，20分鐘左右,。 B、水超洗濾頭，注意換水多超幾次,。

處理：超聲,，降室溫。

二,、檢測流通池長氣泡

流通池是易積存氣泡的地方,，其對基線影響巨大，流動相流入色譜柱后,，壓力越來越小,，微小氣泡將逐漸長大，而流通池截面積遠大于鋼管面積,，則氣泡在池內(nèi)易長大,，氣泡的特點是長大在無外壓的情況下，很難縮小到鋼管內(nèi)經(jīng)以下流出流通池,，所以它就存在了池內(nèi),。 處理方法：1、對于示差檢測器（示差檢測器池只能耐幾個公斤壓力）,，只能是反復(fù)沖洗斥資,，舉高廢液瓶靠廢液管內(nèi)液柱給池加一個微小反壓，所以這就靠成了示差池子排氣困難些,，但無它法,。 

為了避免這類問題的出現(xiàn)，液相色譜實際分析過程中必須重視對流動相進行脫氣處理,。

常用的脫氣方法有以下幾種：

1. 吹氦脫氣法 使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣,，在0.1Mpa壓力下，以約60ml/min流速通入流動相10-15min以驅(qū)除溶解的氣體,。此法使用于所有的溶劑,，脫氣效果較好，但在國內(nèi)因氦氣價格較貴,，本法使用較少,；

2. 加熱回流法 此法的脫氣效果較好；

3. 抽真空脫氣法 此時可使用微型真空泵,，降壓至0.05-0.07MPa即可除區(qū)溶解的氣體,。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成過濾機械雜質(zhì)和脫氣的雙重任務(wù)。由于抽真空會引起混合溶劑組成的變化,，故此法適用于單一溶劑體系脫氣,。對多元溶劑體系應(yīng)預(yù)先脫氣后再進行混合，以保證混合后的比例不變,。

4. 超聲波脫氣法 它是目前實驗室使用zui廣泛的脫氣方法,，將配制好的流動相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡便，基本能滿足日常分析的要求,。

5. 在線真空脫氣法 把真空脫氣裝置串聯(lián)到儲液系統(tǒng)中,，并結(jié)合膜過濾器，實現(xiàn)了流動相在進入輸液泵前的連續(xù)真空脫氣,。此法的脫氣效果明顯優(yōu)于上述幾種方法,，并適用于多元溶劑體系。

其二,，在液相色譜系統(tǒng)開始工作前,，可以用注射器連接恒流泵的排空閥，抽入流動相,，將流路中的空氣驅(qū)趕干凈,。

其三，在注入樣品前注意排出樣品注射器中的空氣,。