酵母菌是基因表達研究和重組蛋白生產(chǎn)的通用宿主,。然而,，傳統(tǒng)酶解法進行酵母mRNA和內(nèi)容蛋白提取通常非常困難,。我們以細胞總RNA提取為例，對各種酵母破壁方法進行比較,。我們用不同的方法對酵母菌破壁,，然后用Trizol試劑進行RNA的提取，zui后進行電泳檢測,，發(fā)現(xiàn)不同破壁方法效果如下：

SPEX公司Freezer/Mill冷凍研磨儀將上述液氮研磨法進一步改良,，使酵母破壁這樣的實驗更加簡單，無人值守即可完成,。將樣品裝入密閉的研磨容器,，浸入液氮，采用電磁振蕩技術,，電磁往復驅(qū)動鋼制撞子,，振蕩裝機樣品，動能慣性更大,，實現(xiàn)高動能撞子大面積撞擊,，快速粉碎研磨。過程中,，樣品始終處于液氮溫度（-196°C）,。

實驗方法：

*步：將樣品研磨罐預冷凍。

第二步：將酵母菌液加入液氮中,，控制速度,，使菌液進入液氮中后形成小顆粒。將菌體液氮顆粒轉入研磨罐中,。放入冷凍研磨儀的樣品倉,。

第三步：設置研磨程序，預冷10-15min,，研磨2min,，15個循環(huán)，兩次研磨之間間歇1min,。

實驗結果：

經(jīng)檢驗，用此法能使得90%以上的酵母細胞破壁,。酵母的RNA和細胞內(nèi)蛋白保持高活性,。