1968年Miles和Hales建立了利用核素標(biāo)記的抗體檢測(cè)抗原的放射分析法，為了與放射免疫分析區(qū)別,，故稱免疫放射分析技術(shù)（immunoradiometric assay,，IRMA）。由于它應(yīng)用核素標(biāo)記抗體作為示蹤劑,，在反應(yīng)體系中加入過(guò)量的抗體,，待測(cè)抗原（或標(biāo)準(zhǔn)品）與和核素標(biāo)記抗體進(jìn)行全量反應(yīng)，故亦稱非競(jìng)爭(zhēng)性免疫分析法,。IRMA與RIA相比較有以下特點(diǎn)：

1,、IRMA反應(yīng)系統(tǒng)中應(yīng)用的標(biāo)記物為免疫球蛋白。易于提純和進(jìn)行碘化標(biāo)記,，標(biāo)記抗體的比活度較高,，有利于提高分析的靈敏度，且不同抗體的標(biāo)記方法基本相同,；而在RIA中應(yīng)用的標(biāo)記物是抗原,。抗原種類繁多,，化學(xué)結(jié)構(gòu)各異，較難獲得純品,，標(biāo)記方法亦多種多樣,。

2、在IRMA反應(yīng)系統(tǒng)中使用過(guò)量的標(biāo)記抗體,，直接與抗原結(jié)合,，不存在競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的復(fù)雜反應(yīng)，因此反應(yīng)速度較快,，即使使用親和力較低的單可隆抗體,，也能滿足實(shí)驗(yàn)要求；而在RIA中抗體是微量的,，所以一定要用高親和力的多可隆抗體

3,、IRMA使用的標(biāo)記抗體和固相抗原在反應(yīng)中都是過(guò)量的，只有待測(cè)樣品加樣誤差才會(huì)影響分析結(jié)果,，因此IRMA的批內(nèi)和批間變異（CV%）比較?。欢鳵IA使用的抗體和標(biāo)記抗原在反應(yīng)中是固定量的,，加樣誤差可嚴(yán)重影響測(cè)定結(jié)果,。

一、基本原理

將核素標(biāo)記在抗體上,，然后以過(guò)量的標(biāo)記抗體與待測(cè)抗原結(jié)合,，未結(jié)合的標(biāo)記抗體通過(guò)和固相的抗原免疫吸附劑結(jié)合而去除,，溶液中的放射性與待測(cè)抗原的含量呈正相關(guān)。根據(jù)檢測(cè)過(guò)程的操作步驟不同,，有以下幾種類型

1,、直接IRMA法

將待測(cè)抗原與過(guò)量的標(biāo)記抗體進(jìn)行溫育，使二者結(jié)合,，然后加入固相抗原免疫吸附劑再次溫育,，吸附游離的標(biāo)記抗體。離心去除沉淀物,，測(cè)定上清液中放射性強(qiáng)度,，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可得知待測(cè)樣品中抗原的含量。

2,、雙抗體夾心IRMA法

在待測(cè)抗原內(nèi)依次加入固相抗體和標(biāo)記抗體,，反應(yīng)后形成固相抗體（Ab1）-抗原-標(biāo)記抗體（Ab2）復(fù)合物，洗滌去除游離的標(biāo)記抗體,，測(cè)定固相抗體或載體上免疫復(fù)合物的放射性強(qiáng)度,，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可得知待測(cè)樣品中抗原的含量。此法僅用于檢測(cè)有多個(gè)決定簇的多肽和蛋白質(zhì)抗原,。

3,、間接IRMA法

此法是在上述雙抗體夾心法的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步改良為用核素標(biāo)記抗Ab2的抗體（羊抗兔或抗鼠的IgG）,，反應(yīng)后形成固相抗體（Ab1）-抗原-Ab2-*Ab3（標(biāo)記抗抗體）的四重免疫復(fù)合物,。其中，Ab3可作為通用試劑,，可省去標(biāo)記針對(duì)不同抗原的特異性抗體,。

4、BSA-IRMA法

是將生物素-親合素系統(tǒng)（BSA）引入免疫放射分析,，建立的新一代IRMA,。此法zui大的優(yōu)點(diǎn)是使用生物素化抗體和以核素標(biāo)記親合素為示蹤劑,，可以通用于甾體類,、前列腺素等小分子物質(zhì)的檢測(cè)。由于1個(gè)抗體分子上可標(biāo)記數(shù)十個(gè)生物素分子,，而每個(gè)親合素又可與4個(gè)生物素分子結(jié)合,，從而產(chǎn)生多級(jí)放大效應(yīng)。同時(shí)生物素與親合素之間的親和力要比抗原抗體間的親和力大10萬(wàn)-100萬(wàn)倍,，二者結(jié)合極為穩(wěn)定,，因此，使其靈敏度,、特異性和精密度都大大提高,。目前一些超靈敏度的IRMA分析試劑盒就是應(yīng)用上述原理制成的,。

二、基本試劑及材料

1,、標(biāo)記抗體

2,、固定抗原吸附劑

3、標(biāo)準(zhǔn)抗原

4,、待測(cè)樣本

5,、γ計(jì)數(shù)儀和低溫離心機(jī)

三、操作方法

以固相雙抗體法測(cè)定血清中促甲狀腺素（TSH）為實(shí)例

1,、按下表逐一加樣（加樣量為ml,，均設(shè)雙復(fù)管）

混勻，37℃溫育120min

棄上清（T*除外,，以下同）,，加2ml洗滌液，放置2min

棄上清,，再加2ml洗滌液,，放置2min

棄上清，將各管倒置在吸水紙上

2,、用γ計(jì)數(shù)儀分別測(cè)量各管放射性強(qiáng)度,，以兩管cpm的均值表示，分別計(jì)算結(jié)合率（B%,，即B/T* ´100%）

3,、用B%為縱坐標(biāo)，不同濃度的TSH標(biāo)準(zhǔn)品為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，然后根據(jù)檢測(cè)管的B%，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中即可查得相應(yīng)的TSH含量