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補體C4溶血活性的測定(試管法)

來源:武漢貝茵萊生物科技有限公司   2010年12月02日 12:01  

將豚鼠血清用水合肼或氨水處理去除其中的C4,這種C4缺乏血清(簡稱R4)不能使致敏的SRBC溶解,,當加入含有C4的受檢血清后,,級聯(lián)酶促反應發(fā)生即可導致致敏的SRBC溶解。溶血的程度與待測血清中C4的活性相關(guān),。

1,、無補體C4-抗原抗體復合物(EAR4)的制備  在新鮮豚鼠血清中按每ml加0.15mol/L氨水0.25ml或0.75mol/L水合肼0.25ml,混合后置37℃水浴30~90min,,滅活其中的C4,。用1mol/LHCl調(diào)節(jié)至pH7.2備用,取5%SRBC懸液與等體積4U溶血素混合為EA,,然后按EA4ml與R40.25ml混合,,室溫放置15rain后使用;

2,、在試管中加入反應物,;

3、結(jié)果判定  按CH50方法進行。正常范圍為8.270±2.087U/ml,。

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