上海江萊生物科技有限公司專業(yè)經銷眾多生命科學領域的ELISA試劑盒,生物試劑,抗體,,培養(yǎng)基,血清。為中國科研試劑供應商之一,質量被全國各大院??蒲袡C構認可,并為Elisa試劑盒長期供應商,,作為戰(zhàn)略合作伙伴,。
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本試劑盒只能用于科學研究,,不得用于醫(yī)學診斷,。
大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)定量檢測試劑盒(ELISA)
使用說明書
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒試劑盒名稱】
大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)定量檢測試劑盒(ELISA)
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒試劑盒用途】
定量檢測大鼠血清,、血漿及相關液體樣本中HMG-CoA還原酶(HMGR)的含量,。
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒檢測原理】
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品,、待測樣本加入到預先包被大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)單克隆抗體透明酶標包被板中,,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,,再加入酶標工作液,,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,。依次加入底物A,、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物,,在酸的作用下變成黃色,,顏色的深淺與樣品中大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,,根據(jù)標準品和樣品的OD值,,計算樣本中大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)含量,。
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒試劑盒組成】
1 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 7 | 顯色劑A液 | 6mL |
2 | 標準品 | 0.3mL×6管 | 8 | 顯色劑B液 | 6mL |
3 | 20倍濃縮洗滌液 | 25mL | 9 | 終止液 | 6mL |
4 | 樣本稀釋液 | 6mL | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 特殊稀釋液 | 6mL | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 酶標試劑 | 6mL | 12 | 密封袋 | 1個 |
備注:標準品(1號→6號)濃度依次為:80、40,、20,、10、5,、2.5 U/L.
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒需要而未提供的試劑和器材】
1,、
2、標準規(guī)格酶標儀
3,、精密移液器及一次性吸頭
4,、蒸餾水
5、一次性試管
6,、吸水紙
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒操作步驟】
1,、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘,。
2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3,、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,,固定于框架上,分別設置標準品孔,、待測樣本孔和空白對照孔,,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL,;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加,。
4,、溫育:
5,、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板),。
6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加,。
7,、溫育:
8,、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板),。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,,再加入顯色劑B液 50μL,,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),
10,、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,,終止反應(顏色由藍色立轉黃色),。
11、測定:以空白孔調零,,在終止后15分鐘內,,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12,、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,,也可以使用各種應用軟件來計算,。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù),。
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑,。
2、標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融,。
3、樣本應充分離心,,不得有溶血及顆粒,。
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒注意事項】
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,。
2、酶標包被板開封后如未用完,,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。
3、建議所有的標準品,、樣本和空白對照都做雙份檢測,,取平均值,以減小實驗誤差,。
4,、牢記樣本已經稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度,。
5,、本試劑盒定量范圍為2.5-80U/L,超過此范圍,,為標準曲線延伸計算所得,,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(2.5-80U/L范圍內),,乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度,。
6、若顯色過淺,,可適當延長底物溫育時間,。
7、為避免交叉污染,,標準品,、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液,、樣本稀釋液和底物等公共組分,,要懸臂加樣,不得碰到微孔,;不得重復使用封板膜,。
8,、試劑盒保質期內使用,不同批號的試劑不得混用,。
9,、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒操作程序總結】
準備試劑,,樣品和標準品
計算
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒檢測范圍】
2.5 U/L - 80 U/L
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒規(guī)格】
96人份/盒
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒貯藏】
2
【大鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)Elisa試劑盒有效期】
6個月
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