切片組織得到很好處理后在進(jìn)行切片之前還應(yīng)對玻璃片進(jìn)行處理，由于我們檢測抗原是多種多樣的,，因染色操作程序復(fù)雜,，時(shí)間較長，有些抗原是要進(jìn)行各種抗原修復(fù)處理,，如微波、高壓,、水溶酶等,，玻片如果得不到很好的處理，將易造成脫片,，為保證免疫組化實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行,，要求在貼片前對載玻片作適當(dāng)處理，必須在清洗干凈的玻片上進(jìn)行粘合劑的處理以防脫片,。
1)Poly-L-Lysine 
一般采用分子量30000左右的0.5%多聚賴氨酸，也可用試劑公司出售的其濃溶液以1：10去離子水稀釋,。方法是將玻片浸泡其中,，傾盡余液，在60℃溫箱中烤干備用,，此方法的優(yōu)點(diǎn)是可以用于多種組織化學(xué),、免疫組化及分子學(xué)檢測中的應(yīng)用,，粘貼效果，但價(jià)格稍貴,。
2)明膠硫酸鉻鉀法
將2.5g明膠加熱溶于500ml蒸餾水中,，*溶解冷卻后加入0.25g硫酸鉻鉀攪勻充分溶解即可使用。方法是將玻片浸泡其中2 min,，取出控盡液體入溫箱中烤干備用,。此法價(jià)格便宜、方法簡單,，任何實(shí)驗(yàn)都可以使用，特別適用于大批量的使用,，但應(yīng)注意,，如果液體變藍(lán)或粘稠狀停用。
3)APES (3-氨丙基-乙氧基甲硅烷)
此法必須現(xiàn)用現(xiàn)配,。將洗凈玻片入1:50丙酮稀釋的APES中,，浸泡20s，取出稍停再入丙酮或蒸餾水中刷去末結(jié)合的APES晾干即可,。用此方法粘合的玻片應(yīng)垂直烤片不能平拷,，否則組織片中易出現(xiàn)氣泡。
  切片必須保持切片刀銳利,，切片要薄而平整,、無皺摺、無刀痕,，如有上述問題的切片在進(jìn)行免疫組化染色都將出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象,，切片厚度一般為3~4μm，切好的切片在60℃溫箱中過一夜,，注意烤片的溫度不宜過高,，否則易使組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞，而產(chǎn)生抗原標(biāo)記定位彌漫現(xiàn)象,。