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RNA提取試劑盒使用注意事項

來源:上海優(yōu)研生物科技有限公司   2010年10月22日 17:49  

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嚴格控制實驗條件,避免任何可能的污染,,是保證實驗成功的關鍵,。
為此,必須作到以下幾點:
1.如果可能,,實驗室應專門辟出RNA操作區(qū),,離心機,移液器,,試劑等均應,。RNA操作區(qū)應保持清潔,并定期行除菌,。
2.如果可能,,在超凈臺中按照細胞培養(yǎng)的要求進行操作,可以有效避免操作中引起的RNA酶污染,。
3.操作過程中應始終戴一次性橡膠手套,,并經(jīng)常更換,以防止手,、臂上的細菌和真菌以及人體自身分泌的RNA酶帶到試管或污染用具,,盡避免使用一次性塑料手套。塑料手套不但常常造成操作不便,且塑料手套的多出部分常常在器具的RNase污染處和RNase-free處傳遞RNase,,擴大污染。
4.避免在操作中說話聊天,。也可以戴口罩以防止引起 RNA酶污染,。
5.盡量使用一次性的塑料制品,盡量避免共用器具如濾紙,,tips,,tubes等,以防交叉污染,。例如,,從事RNA探針工作的研究者經(jīng)常使用RNase H,T1等,,在操作過程中極有可能造成移液器,、離心機等的污染。而這些污染了的器具是RNA操作的大敵,。
6.RNase AwayTM試劑可以替代DEPC,,操作簡單,價格低,,且無毒性,。只需將 RNase AwayTM直接倒在玻璃器皿和塑料器皿的表面,浸泡后用水沖洗去除,,即可以快速去除器皿表面的RNase,,并且不會殘留而干擾后繼實驗。
7.如果您需要遠距離運輸或長期儲藏RNA樣品,,建議先將標本(細胞,、組織)保存在RNA保存液(RNAwait、RNAlater)中,,使細胞內(nèi)的RNA與RNA酶分離,,在室溫可以保存7天,4℃可以保存4周,,-20℃,、-80℃可以長期存檔保存標本,RNA質(zhì)量不受影響,,用各類方法抽提仍可以獲得高質(zhì)量的RNA,。
8 關于一次性塑料制品,建議使用廠家供應的出廠前已經(jīng)滅菌的tips和tubes等,。多數(shù)廠家供應的無菌塑料制品很少有RNA酶污染,,買來后可直接用于RNA 操作。許多研究者用DEPC等處理的塑料制品,往往由于二次污染而帶有RNA酶,,從而導致實驗失敗,。
9.配制溶液用的酒精、異丙醇,、 Tris等應采用未開封的新瓶,。
10所有舊塑料制品都必須用0.5M的NaOH處理10分鐘,用雙蒸水*沖洗,,DEPC-H20浸泡過夜后滅菌,。
11.無法用DEPC處理的用具可用氯仿擦拭若干次,這樣通??梢韵齊NA酶的活性,。但氯仿會溶解某些塑料制品,應當注意,。

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