毛細(xì)管電泳色譜儀分離分析模式有哪些?毛細(xì)管電泳色譜儀各種分離分析模式原理是什么,?下面蘇州萊頓就為大家介紹毛細(xì)管電泳色譜儀分離分析模式詳解。
毛細(xì)管電泳色譜儀(CE)是以毛細(xì)管為分離通道,,以高壓直流電場為驅(qū)動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數(shù)差異進(jìn)行分離,,是分析科學(xué)繼液相色譜儀之后的又一重大進(jìn)展,,使分析科學(xué)從微升級進(jìn)入到了納升級水平,正成為生物樣品zui重要的分離分析手段,。CE分離分析模式有毛細(xì)管電色譜,、毛細(xì)管區(qū)帶電泳、毛細(xì)管膠束電動色譜,、毛細(xì)管凝膠電泳、毛細(xì)管等電聚焦電泳和毛細(xì)管等速電泳等,。
一,、毛細(xì)管電色譜:
1、固定相:色譜固定相,。
2,、原理:在毛細(xì)管中填充固定相顆粒、管壁鍵合固定相或制成連續(xù)床固定相,,以電滲流或電滲流與壓力共同驅(qū)動流動相,,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)差異和本身淌度差異進(jìn)行分離。
3,、特點(diǎn):分離效率比液相色譜高,,選擇性比毛細(xì)管區(qū)帶電泳高,,分析速度快,分析結(jié)果重復(fù)性好,。
4,、應(yīng)用:是有發(fā)展前景的分離方法,填充毛細(xì)管電色譜在蛋白質(zhì)分析中有重要潛力,。
二,、毛細(xì)管區(qū)帶電泳:
1、原理:根據(jù)樣品各組分質(zhì)荷比的不同進(jìn)行分離,。
2,、特點(diǎn):是CE中zui基本、應(yīng)用zui廣泛的一種分離模式,。
3,、應(yīng)用:適用于分離蛋白質(zhì)、多肽和帶電荷的大小分子,。
三,、毛細(xì)管膠束電動色譜:
1、原理:在電泳緩沖溶液中加入表面活性劑,,當(dāng)溶液中表面活性劑濃度超過臨界膠束濃度時(shí),,表面活性劑分子之間的疏水基團(tuán)聚集在一起形成膠束,成為分離體系的準(zhǔn)固定相,,根據(jù)樣品各組分在水相和膠束相中的分配系數(shù)差異進(jìn)行分離,。
2、特點(diǎn):可在分離離子型化合物的同時(shí)進(jìn)行中性物質(zhì)的分離,。
3,、應(yīng)用:在各個(gè)領(lǐng)域顯示出廣泛的應(yīng)用前景。
四,、毛細(xì)管凝膠電泳:
1,、載體:聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠,前者應(yīng)用zui多,。
2,、原理:分子篩效應(yīng)。
3,、特點(diǎn):峰形尖銳,,是CE中柱效zui高的一種分離模式。
4,、應(yīng)用:用于測定核酸片斷和蛋白質(zhì)相對分子量,,是研究DAN排序的重要手段。
五、毛細(xì)管等電聚焦電泳:
1,、原理:利用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子等電點(diǎn)的不同,,在一個(gè)穩(wěn)定、連續(xù),、線性的pH梯度中進(jìn)行分離,。
2、特點(diǎn):分辨率高,,區(qū)帶清晰且窄,。
3、應(yīng)用:可分離等電點(diǎn)差異小于 0.01pH單位的兩種蛋白質(zhì),,特別適合分離相對分子量相近而等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)組分,。
六、毛細(xì)管等速電泳:
1,、原理:用淌度比樣品中任何組分的淌度都高的電解質(zhì)作為先導(dǎo)電解質(zhì),,用淌度比樣品中任何組分的淌度都低的電解質(zhì)作為尾隨電解質(zhì),樣品組分夾在先導(dǎo)電解質(zhì)和尾隨電解質(zhì)之間,,根據(jù)各自有效淌度的不同進(jìn)行分離,。
2、特點(diǎn):區(qū)帶界面明顯,,具有富集和濃縮作用,。
3、應(yīng)用:目前應(yīng)用不多,。
以上就是毛細(xì)管電泳色譜儀分離分析模式詳解,。
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