導(dǎo)讀：為了刺激研究界實(shí)現(xiàn)更高標(biāo)準(zhǔn)的抗體重復(fù)性，抗體驗(yàn)證工作組(IWGAV)近日出臺(tái)了一套指南,。這些指南發(fā)表在9月5日的《Nature Methods》雜志上，強(qiáng)調(diào)了抗體驗(yàn)證需要針對(duì)應(yīng)用和背景來開展,。

　　據(jù)估計(jì)，因抗體質(zhì)量不佳,，生命科學(xué)領(lǐng)域每年的損失達(dá)到8億美元,。同時(shí)，這也造成了無數(shù)的實(shí)驗(yàn)失敗,，浪費(fèi)了寶貴的樣本和科學(xué)家的青春,。盡管科學(xué)界已經(jīng)意識(shí)到這個(gè)問題，但目前仍然缺乏抗體驗(yàn)證的整體框架,。

　　為了刺激研究界實(shí)現(xiàn)更高標(biāo)準(zhǔn)的抗體重復(fù)性,，抗體驗(yàn)證工作組(IWGAV)近日出臺(tái)了一套指南。這些指南發(fā)表在9月5日的《Nature Methods》雜志上,，強(qiáng)調(diào)了抗體驗(yàn)證需要針對(duì)應(yīng)用和背景來開展,。

　　這篇題為“A Proposal for Validation of Antibodies”的文章是由IWGAV的數(shù)名成員發(fā)表的，包括工作組主席,、瑞典*理工學(xué)院的微生物學(xué)教授Mathias Uhlén,。文章提出了五點(diǎn)，以指導(dǎo)特定應(yīng)用中的抗體驗(yàn)證,。

　　• 遺傳策略：測定對(duì)照細(xì)胞或組織中的相關(guān)信號(hào),，這些對(duì)照中的目標(biāo)基因已利用CRISPR或RNAi等技術(shù)敲除或敲低。

　　• 正交策略：利用不依賴抗體的方法定量多個(gè)樣品,，然后檢查依賴抗體和不依賴抗體這兩種定量之間的相關(guān)性,。

　　• 獨(dú)立抗體策略：利用兩個(gè)或更多的獨(dú)立抗體來識(shí)別目標(biāo)蛋白上的不同表位，再通過比較和定量分析來確認(rèn)特異性,。

　　• 表達(dá)標(biāo)記蛋白：修飾內(nèi)源的目標(biāo)基因,，增加親和標(biāo)簽或熒光蛋白的序列。標(biāo)記蛋白的信號(hào)可與基于抗體的檢測相關(guān)聯(lián),。

　　• 免疫捕獲加上質(zhì)譜分析：將免疫捕獲與MS分析相結(jié)合,，以確定與純化的抗體直接作用的蛋白質(zhì)，以及可能與目標(biāo)蛋白形成復(fù)合物的蛋白質(zhì),。

　　這篇文章還對(duì)生產(chǎn)商和使用者提出建議,，以確保長期的抗體重復(fù)性。作者們建議使用者在自己特定的應(yīng)用或樣品中,，至少運(yùn)用上面的一種策略來開展驗(yàn)證,。同時(shí)，他們還建議使用者按照一定的形式報(bào)告,，包含貨號(hào),、批號(hào)和RRID(研究資源標(biāo)識(shí)符)，以確保研究中使用的任何抗體可被明確識(shí)別,。

　　同時(shí),，作者們也向生產(chǎn)商提出了類似的建議,，至少運(yùn)用一種策略來驗(yàn)證，并提供盡可能多的抗體信息,，如鑒定檢測中的抗體濃度,、細(xì)胞提取物的濃度、抗體生產(chǎn)所用的免疫原,、抗體-表位的親和力,、緩沖液配方等。

　　“這篇文章邁出了重要的*步,，有望制定出廣泛接受的抗體驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn),，確保生命醫(yī)學(xué)研究使用高質(zhì)量且一致的抗體，”Uhlén博士表示,。“我們期待抗體用戶,、出版商、資助機(jī)構(gòu)和生產(chǎn)商的反饋,，以幫助加強(qiáng)這個(gè)初步建議,，并確保這些基本工具的可靠性。”

　　在文章發(fā)布之后,，抗體生產(chǎn)商之一 – 賽默飛世爾公司承諾,，它將按照IWGAV的建議來驗(yàn)證其抗體的特異性。賽默飛表示,，它將很好地遵循這個(gè)指南,，并借助其的質(zhì)譜、CRISPR和siRNA平臺(tái)來開展驗(yàn)證,。此外,，對(duì)于通過新標(biāo)準(zhǔn)的抗體，公司會(huì)在上標(biāo)注,，以表示它通過特異性檢測,。

　　賽默飛世爾的生命科學(xué)部門總裁Peter Silvester表示：“賽默飛世爾很高興看到抗體驗(yàn)證工作組的*個(gè)建議。我們相信,，這些標(biāo)準(zhǔn)將有助于對(duì)抗用戶在使用這些關(guān)鍵工具時(shí)面臨的挑戰(zhàn),。我們承諾按照IWGAV的標(biāo)準(zhǔn)來測試我們的抗體，這證明了我們對(duì)科學(xué)的承諾,，以及我們提供特異抗體的使命。”

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