市場(chǎng)上的胎牛血清種類繁多,，魚(yú)龍混雜，很多科研工作者,，特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人，難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣,。今天勁馬為您解讀如何選擇的胎牛血清以及影響因素,。
一、外觀
    拿到血清,，zui先接觸的是血清外觀,，對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來(lái)說(shuō)，外觀的判斷尤為重要
1,、顏色
    根據(jù)血紅蛋白含量的不同,，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,，實(shí)際上,，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,，良好的操作能降低血清的溶血,。
國(guó)產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散，大多是由屠戶采血后馬上離心收集,，所以很少會(huì)有溶血,，表現(xiàn)出明亮的蠟黃色，當(dāng)然,，國(guó)產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清,。進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血，因?yàn)檎嬲奶ヅＱ迥δ懿?，紅細(xì)胞容易破裂,。總的來(lái)說(shuō),，國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃,。進(jìn)口的血清，質(zhì)量的呈現(xiàn)出談黃,、微紅色,，如Gibco 16000，差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色,。當(dāng)然,，熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难澹捎谘t蛋白的破壞氧化,，會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,，甚至咖啡色。
2、沉淀
    很多血清客戶,，會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,，從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題，這是沒(méi)有根據(jù)的,。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響,，沉淀的產(chǎn)生原因很多,，和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國(guó)產(chǎn)的血清,，大多來(lái)自北方,，由于價(jià)格低廉，保存環(huán)境都不好,，從采血,、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過(guò)多次凍融,，每次凍融過(guò)程,，就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀，這樣,，血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的“干凈”,，很少有沉淀產(chǎn)生。進(jìn)口的胎牛血清,，過(guò)濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融,，生產(chǎn)后的成品也是清澈的，但隨著時(shí)間的推移,，血清中的大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀,。當(dāng)然，進(jìn)口的新生牛血清,，一般牛齡都在2周左右,，血清中的各種蛋白含量明顯偏高，生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾濁,，甚至有大量沉淀,。當(dāng)然，購(gòu)買回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài),，使用時(shí)需要融化,，融化過(guò)程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行，否則沉淀相對(duì)較多,，雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,，但對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3、澄清度
    進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,，表現(xiàn)為稀薄,、清淡，而國(guó)產(chǎn)血清,，因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,，相對(duì)而言更加粘稠，顏色略深,，這對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷,，但把兩者進(jìn)行對(duì)比，可容易分辨,。
二,、主要技術(shù)指標(biāo)
    目前國(guó)內(nèi)血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是2005版的《中華人民共和國(guó)藥典》，主要指標(biāo)有以下幾點(diǎn)：
1,、內(nèi)毒素
    標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml,。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分，因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況,。目前,，國(guó)產(chǎn)血清基本都能達(dá)到這一要求，很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高,，如Gibco 26140,，只要求不高于50EU/ml，高出我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)10倍,，即使是16000,，也要10EU/ml，血清質(zhì)量也未見(jiàn)影響,?？梢?jiàn)，內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量,，除非含量*,，預(yù)示著已經(jīng)污染。
2,、總蛋白含量
    胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,，數(shù)值偏高，說(shuō)明采血的牛齡偏大,，不是胎牛,，數(shù)值偏低，表明血清可能摻水了,。
3,、血紅蛋白
    標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,，顏色越紅，數(shù)值越高,，反之,，數(shù)值越低。
4,、pH
    國(guó)產(chǎn)血清,，大多高于7.5，進(jìn)口胎牛血清,，大多低于7.5,，具體原因未知，可能和牛齡有關(guān),，這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。
5,、微生物
    包括細(xì)菌,、霉菌、支原體,、噬菌體,、各類病原性病毒等。隨著國(guó)內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,，細(xì)菌,、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制，支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾,，大多也能清除,。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的，主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,，又無(wú)法過(guò)濾,，很難*清除，但對(duì)血清質(zhì)量影響不大,。病原性病毒,，特別是BVDV，在國(guó)產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,，這類微生物是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,，而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。
6,、免疫球蛋白
    國(guó)產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè),，結(jié)果也很不準(zhǔn)確，進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè),。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時(shí)的牛齡情況,，國(guó)產(chǎn)血清，基本都是新生牛的，血清中容易產(chǎn)生IgM,，IgG的含量也偏高,，進(jìn)口胎牛血清，不含IgM,，IgG的含量也較低,。
7、其它
    不管是國(guó)產(chǎn)還是進(jìn)口血清,，都是不測(cè)抗生素的(無(wú)四環(huán)素胎牛血清除外),。國(guó)外，抗生素的使用很嚴(yán)格,，用量也很少,，每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國(guó)內(nèi),，抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象,，血清中殘留很高，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,，這是國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因,。
三、血源
    市場(chǎng)上的血清血源主要分為中國(guó),、北美,、南美和澳洲。
1,、國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差,，這是*的，主要原因并不是生產(chǎn)廠家的責(zé)任,，而是天然環(huán)境差和抗生素的大量使用,。國(guó)內(nèi)環(huán)境污染嚴(yán)重，同時(shí)飼養(yǎng)過(guò)程中抗生素極其濫用,，有毒有害物質(zhì)會(huì)大量殘留在血清中,，zui終不利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。
2,、南美血清,，來(lái)源很多，如Bioind的巴拿馬,、Gibco的烏拉圭,、巴西等，這些血清由于采血的不可控性,，質(zhì)量參差不齊,，當(dāng)然,，相對(duì)于國(guó)內(nèi)血清來(lái)說(shuō)好的多。另外,，國(guó)內(nèi)銷售的南美血清大多顏色鮮紅,，如Bioind、Gibco,、Hylone等品牌,，但阿根廷的血清例外，這可能和各國(guó)的采血,、生產(chǎn)工藝有關(guān),。
3、北美血清,，主要來(lái)自美國(guó)和加拿大,，如Hclone的SH30396、SH30070,、SH30071,、Gibco的16000-044、26140-079等,。這類血清，等級(jí)越高的顏色越淡,，表現(xiàn)為淡黃中帶一點(diǎn)微紅,，SH30070和SH30396對(duì)比就很明顯，特級(jí)胎牛血清基本就能進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng),。北美血清還有一個(gè)顯著特點(diǎn)就是每瓶血清都能溯源,，這對(duì)一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要,。
4,、澳洲血清，來(lái)源主要是新西蘭和澳大利亞,，這是在北美血清禁運(yùn)之后進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)的,，一般不具有溯源功能，由于生產(chǎn),、運(yùn)輸?shù)仍?，價(jià)格相對(duì)來(lái)說(shuō)比較貴。拿Gibco的10099和16000相比較,，后者質(zhì)量等級(jí)更高,，顏色更淡，性價(jià)比更高,。