油紅O染色實(shí)驗(yàn)操作方法：

（1）冰凍切片厚度 6～10µm,，不固定或 10%福爾馬林固定 10min后水洗

（2）切片加入60%的異丙醇內(nèi)浸洗 2min

（3）用冰蒸餾水稍微清洗一遍（說(shuō)明書(shū)沒(méi)說(shuō)明要洗）

（4）切片加入改良油紅 O 染色液中,，密閉染色 10～15min，該過(guò)程注意避光

（5）用冰蒸餾水清洗一遍（說(shuō)明書(shū)沒(méi)說(shuō)明要洗）

（6）加入 60%的異丙醇內(nèi)稍洗以去除染液（大約幾秒）

（7）加入冰蒸餾水中稍微清洗一遍

（8）Mayer 蘇mu素染色液復(fù)染核 5min

（9）用冰蒸餾水清洗一遍

（10）片子用濾紙吸干水分

（11）用甘油明膠或阿拉伯糖膠封片,。

油紅O染色實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

1. 石蠟切片不能用于油紅O染色,，原因在于石蠟包埋過(guò)程中需要脫水，脫水過(guò)程中需要乙醇-二甲苯和石蠟,，二甲苯是有機(jī)溶劑,，會(huì)把中性脂肪溶解；

2. 冰凍切片準(zhǔn)備時(shí)，包埋的降溫過(guò)程建議選擇干冰,，原因在于若選擇液氮降溫過(guò)程較強(qiáng)烈,，可能導(dǎo)致組織內(nèi)部炸裂，而干冰降溫的過(guò)程比較緩和,，染出來(lái)的片子比較好看,；

3. 切片的厚度要稍微厚一些，建議選擇8-10μm,；

4. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)建議設(shè)計(jì)陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照,，如陽(yáng)性對(duì)照可以用脂質(zhì)豐富的肝臟組織等，陰性對(duì)照可以根據(jù)文獻(xiàn)來(lái)選擇無(wú)脂肪沉積的組織,。