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病理HE實(shí)驗(yàn)

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更新時間:2022-12-23 09:49:28瀏覽次數(shù):1270次

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病理HE實(shí)驗(yàn):蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,,簡稱HE染色法 ,,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿性 ,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸性染料 ,,主基質(zhì)中的成分著紅色 。

易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia ),;而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性(neutrophilia),。
構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多,它們有不同的等電點(diǎn),。在普通染色法中,,染色液的酸堿度為pH6左右,,細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì),、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜堿性,。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白,、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜酸型,。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,,pH值升高時,則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性,;pH值降低時,,原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝浴K哉f染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng),。
脫氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,,帶負(fù)電荷,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結(jié)合使胞漿染色,細(xì)胞漿,、紅細(xì)胞,、肌肉、結(jié)締組織,、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對比。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料,。
由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣,。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),,如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,,胞漿等其它成分脫色,。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色,。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來,。
 

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