一、實驗原理
細(xì)胞劃痕(wound healing)法是簡捷測定細(xì)胞遷移運動和修復(fù)能力的方法,，類似體外傷口愈合模型,，在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上，用微量槍頭或其它硬物在細(xì)胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線,，去除中央部分的細(xì)胞,，然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實驗設(shè)定的時間，取出細(xì)胞培養(yǎng)板,，觀察周邊細(xì)胞的生長遷移能力,，實驗通常需設(shè)定正常對照組和實驗組，實驗組是加了某種處理因素或藥物,、外源性基因等的組別,，通過不同分組之間的細(xì)胞對于劃痕區(qū)修復(fù)能力的不同，可以判斷各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力,。
二,、實驗步驟
1、 所有要滅菌,，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min. .
2,、先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著,，大約每隔0.5-1cm一道,，橫穿過孔，每孔至少穿過5           條線,。

3,、在空中加入約5X105個細(xì)胞(具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿),，37C培養(yǎng)箱培              養(yǎng),。

4、第二天用10μ1槍頭比著直尺,，與標(biāo)記線垂直的方向劃兩條平行線,，槍頭要垂直，不能傾斜,。
5,、用PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞,，加入無血清培養(yǎng)基,。
6、放入37°C 5% CO2培養(yǎng)箱,，按0,、6,、12、24h倒置顯微鏡觀察,，拍照,。