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上海達(dá)為科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)總結(jié)會(huì)

時(shí)間:2024-5-23閱讀:643
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2024年58日,周,公司組織,,由實(shí)驗(yàn)室主管劉博主導(dǎo),實(shí)驗(yàn)室全體成員參與,,對(duì)結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)點(diǎn),,進(jìn)行了培訓(xùn)與交流。本次會(huì)議,,主要針對(duì)結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng),,就以下內(nèi)容展開(kāi)了交流

1.組織4℃條件下從醫(yī)院取回。

2.消毒取樣的15ml管,,取出組織,,放到10ml大皿中。

3.用含4抗的PBS溶液浸泡,,清洗組織,。

4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍,。

5.將組織剪成1mm3大小的組織塊,,轉(zhuǎn)移到15ml管中消化。

6.在37℃水浴鍋中,,消化15min,。

7.取少量液體在顯微鏡下觀察,看到較多的單細(xì)胞和較少的細(xì)胞簇后,,終止消化,。

8.用100μm篩過(guò)濾,然后300g4℃離心5min,,移去上清,。

9.重懸沉淀,,轉(zhuǎn)移到2ml離心管中,,300g4℃離心5min,移去上清,。

10.估算沉淀的細(xì)胞量,,以1:25的比例添加基質(zhì)膠,重懸,。

11.24孔板鋪板,,冰上操作,每孔點(diǎn)膠25ul,。

12.鋪板后,,放到37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中15min成膠,。

13.然后每孔添加600ul 結(jié)直腸癌類器官培養(yǎng)基,放到37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中,。

 

本次會(huì)議,,提升公司對(duì)結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)的重要知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)知


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