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液相色譜特點(diǎn)及對流動(dòng)相的要求
閱讀：2176發(fā)布時(shí)間：2015-10-8
液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的,。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,，小顆粒具有柱效，但會(huì)引起阻力,，需用壓輸送流動(dòng)相,，故又稱壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC),。又因分析速度快而稱為速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography,，HSLP)。也稱現(xiàn)代液相色譜,。
HPLC與經(jīng)典液相色譜相比有以下點(diǎn)：
速度快——通常分析一個(gè)樣品在15~30 min,，有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。
分辨率——可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到*分離效果,。
靈敏度——紫外檢測器可達(dá)0.01ng,，熒光和電化學(xué)檢測器可達(dá)0.1pg。
柱子可反復(fù)使用——用一根色譜柱可分離不同的化合物,。
樣品量少,，容易回收——樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備,。
HPLC對流動(dòng)相的基本要求是：
①與固定相不互溶,，不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
②對樣品有適宜的溶解度,，要求k值在1～10范圍內(nèi)（可用范圍）或2～5（*范圍）,。溶解度太大，k值太小,，不利于分離,；溶解度太小，k值太大,，可能使樣品在流動(dòng)相中產(chǎn)生沉淀,。
③必須與檢測器相適應(yīng)。例如用紫外檢測器,，流動(dòng)相本身在檢測波長處應(yīng)無吸收,。
④流動(dòng)相的粘度要小，可以降低色譜柱的阻力而提柱效。
⑤純度,，不含機(jī)械雜質(zhì),。
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