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綜合評價C18色譜柱性能的實驗方法介紹
閱讀：3251發(fā)布時間：2013-5-17
液相色譜中使用C18柱的反相色譜法以生物體相關(guān)物質(zhì)為分析對象，能夠滿足主要研究領(lǐng)域的需要,，使用,。而隨著硅膠原料、鍵合方式,、封尾方式的不同,，生產(chǎn)出的色譜柱性能也不同，市場上則因此有數(shù)以百計性能不同的C18柱,。而評價這些色譜柱的性能一般需要從以下4點入手：
1,、對化合物的保留能力；
2,、對酸性及中性化合物的理論塔板數(shù)和峰形,；
3、對性（堿性）化合物的峰形,；
4,、對配位化合物的峰形。
針對上述四點原則,，本公司建立了統(tǒng)一的標準,，以此來評價自己生產(chǎn)的C18色譜柱。
具體測定方法如下：
樣品：尿嘧啶-甲苯-苯乙烷-阿米替林-醌茜五種物質(zhì)混合物,；
CoMetro液相色譜儀-等度系統(tǒng)（包括：6000LDI恒流泵,，6000PVW紫外/可見可編程檢測器）；
紫外/可見檢測器：波長210nm,；
流動相：5mmol/L磷酸鹽緩沖液（pH=7）-甲醇=20:80,；
流速：1.0mL/min；
柱溫：25℃
在此方法下,，這五種物質(zhì)的色譜行為都能夠側(cè)面反映色譜柱某一項性能的大致情況,，有較好的科學性和說服力，這五種物質(zhì)的結(jié)構(gòu)是及具體作用如下：
| 尿嘧啶
| 典型的性化合物,，親水性*,，在C18色譜柱中幾乎沒有保留，則可以用來測定系統(tǒng)的死時間,。 |
| 甲苯/苯乙烷
| 非性化合物,，不會與C18色譜柱中的殘余硅羥基作用，則可以用來標定色譜柱的理論塔板數(shù),，同時其峰形良好也是對色譜柱的基本要求,。 |
| 阿米替林
| 含氮有機堿，在中性環(huán)境下能形成穩(wěn)定的氮正離子,，能與色譜柱中的殘余硅羥基形成靜電作用,，其拖尾因子能側(cè)面反映色譜柱殘余硅羥基的數(shù)量,。 |
| 醌茜
| 典型的螯合物，能與色譜柱中的金屬離子作用,，其拖尾因子則可以側(cè)面反映出色譜柱中金屬離子的含量,。 |
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