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死體積對柱效的影響
閱讀:11491發(fā)布時間:2012-3-30
我們可以設想這樣一個場景,,在一條湍急的河流中倒入一瓶墨水,墨水首會是一個小小的點,,漸漸順水流而行一點點擴散,,而到下游的時候肯定已不再是一個點,而是一個寬寬的譜帶了,。這個現(xiàn)象*適用于HPLC的分析,,試想樣品由進樣器起步為一個小小的點,流經(jīng)管路和色譜柱,,當?shù)竭_檢測池時必然也像墨水一樣不可避免的有擴散,,如果擴散小那么色譜圖中峰寬就小,擴散大峰寬也大,。為了得到較小的理想峰寬,,我們就不得不討論到一個常見的術語——死體積。
液相中的死體積,,是指不被固定相滯留的組分,,從進樣到其出現(xiàn)zui大峰值時,所消耗流動相的體積,。死體積包括三個部分:進樣器至色譜柱管路及色譜柱出口管路的體積,;色譜柱內(nèi)固定相顆粒間的間隙(被流動相所占據(jù),Vm),;的體積,;檢測器流動池的體積。本文中重點討論系統(tǒng)管路對色譜峰寬的影響,。
就像小河一樣,,如果河流窄的話,墨水肯定擴散就小,,同樣,,液相系統(tǒng)管路細,擴散就小,。那么管路的粗細到底對譜圖的結(jié)果有多大的影響,,筆者在長期檢驗色譜柱柱效的工作中有過這樣的經(jīng)歷:把進樣器到色譜柱這一段管路,內(nèi)徑由0.25mm更換成0.5mm,,筆者發(fā)現(xiàn)本來柱效合格的色譜柱變的遠遠低于合格標準,,即由80000N/m的柱效下降到了50000N/m,如下圖,,峰展寬明顯,。
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而0.5mm在液相色譜系統(tǒng)中其常見,一般多用于壓泵出口到進樣器這一段,,可以降低系統(tǒng)壓力,。而進樣器之后則盡可能選擇較細的管路,。
因此,為避免柱效降低及峰展寬的發(fā)生,,應盡量減少連接管路的長度,,縮小連接管路的直徑,減少系統(tǒng)中的死體積,。
上面都為筆者工作中小小心得,,有不科學的地方希望同行能給予指正,共同進步,。
天津琛航科苑科技發(fā)展有限公司主營產(chǎn)品:新一代柱后衍生系統(tǒng),二元梯度系統(tǒng),高效液相色譜儀梯度系統(tǒng)
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