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色譜柱的物理性質(zhì),、化學(xué)性質(zhì)介紹
閱讀:2454發(fā)布時(shí)間:2022-5-17
色譜柱的物理性質(zhì)、化學(xué)性質(zhì)介紹
色譜柱的選擇直接影響了液相色譜分析中分離效果的好壞,,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開(kāi)發(fā)所需的時(shí)間,,并且使方法更具穩(wěn)定性。
根據(jù)色譜柱的參數(shù)可以給我們提供一個(gè)初步的選擇,,但由于各個(gè)儀器廠商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異,。即使都是C18柱,,不同品牌、同一品牌不同系列都有不同的功能,,有能耐受低pH值的,、有耐溫的、有適合堿性樣品的等等,。
一,、物理性質(zhì):
1、柱長(zhǎng),,內(nèi)徑,,如250*4.6mm。一般柱長(zhǎng)在2—250mm,,柱越長(zhǎng),,分離度越,但柱壓更,,分離所需時(shí)間更長(zhǎng);但分離度與理論塔板數(shù)的平方根成正比,,所以一昧增加柱長(zhǎng)并不是*的分離手段,,一般情況下,150mm,、5um的填料可以提供足夠的塔板數(shù),。
2、粒徑,,影響色譜分離度,。粒徑越小,分離越快,,柱效越,,但柱壓力越,柱容易被污染,,導(dǎo)致柱壽命降低,。常見(jiàn)分析柱通常使用5um填料,復(fù)雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒徑,,更大內(nèi)徑的制備色譜柱通常使用更大的粒徑,。
3、孔徑,,60A,,100A,120A,,300A等,??讖叫。瑒t含孔率,,比表面積大,,載碳量;色譜柱填料孔徑大小需和分子大小相匹配,,分子自由進(jìn)出填料孔并與孔內(nèi)表面的鍵合相進(jìn)行分離分配,,通常要求孔徑直徑是分子直徑的3倍以上,一般小分子使用80—120A,,大分子使用300A,。
4、顆粒形狀,,一般有球形和不規(guī)則形,,當(dāng)使用黏度較大的流動(dòng)相時(shí),球形顆??梢越档椭鶋?,延長(zhǎng)色譜柱壽命。
二,、化學(xué)性質(zhì):
1,、硅膠基質(zhì):通用的基質(zhì),度大,,化學(xué)修飾容易,,但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,修飾的可以達(dá)到1—12),。
2,、聚合物基質(zhì):多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學(xué)穩(wěn)定,,應(yīng)用pH范圍寬,,具有更的疏水性,對(duì)蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好,;但度較小,,有機(jī)溶劑可能導(dǎo)致聚合物溶脹而受損,批次重復(fù)性較差,,商品化色譜柱不多,,一般價(jià)格較貴。
3,、載碳量:基質(zhì)表面鍵合相的比例,,載碳量,則保留增加,適合分析非性化合物,。
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