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如何判斷是色譜柱出現(xiàn)問題導(dǎo)致雙峰出現(xiàn)呢
閱讀：2784發(fā)布時(shí)間：2021-12-28
明明實(shí)驗(yàn)時(shí)只分析一種物質(zhì),，為什么峰圖會(huì)出現(xiàn)雙峰呢,？通常情況下，正確的峰型應(yīng)該是尖銳而對(duì)稱的,，出現(xiàn)雙峰應(yīng)該是實(shí)驗(yàn)過程中有錯(cuò)誤的步驟導(dǎo)致的,。液相色譜出現(xiàn)“雙峰”的原因有多。一般有以下幾種原因：色譜柱,、溶劑,、進(jìn)樣量、樣品特性和pH值,。簡(jiǎn)單介紹其中色譜柱,、溶劑因素導(dǎo)致出現(xiàn)雙峰及解決辦法。
如何判斷是色譜柱出現(xiàn)問題導(dǎo)致雙峰出現(xiàn)呢,？操作人員分析單一純物時(shí),，如果每個(gè)色譜峰都出現(xiàn)雙峰，可以確定是色譜柱頭受損或者是柱頭污染了,。如果是色譜柱正常,，進(jìn)樣量少并且色譜峰形為一大峰帶一小峰，不一定拖尾,，這種情況可能是柱頭受堵,。可以將色譜柱反過來接,，用流動(dòng)相或其它溶劑沖洗掉堵在柱頭的殘留物，然后再反過來,，一般都能解決,。如果反復(fù)還是不能解決問題,，可能是柱頭塌陷的問題。液相色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上,，但是柱子使用一段時(shí)間后,，可能有一些吸附作用的物質(zhì)保留于柱頂造成柱頭塌陷，這時(shí)可補(bǔ)加填料使柱效恢復(fù),。每次使用完色譜柱后,，需用洗脫能力的洗脫液沖洗，以延長(zhǎng)色譜分析柱的壽命,。
色譜柱頭塌陷的原因有多,，比較常見的是色譜泵壓力過，填料壓碎產(chǎn)生空隙,。除此之外還有諸如裝填時(shí)壓力過低,，不密實(shí)；流動(dòng)相溶解填料,，造成空隙,；色譜柱入口篩板堵塞等原因。色譜篩板能地?cái)r截樣品,、流動(dòng)相或管線及密封件的顆粒物對(duì)色譜柱的污染,，保護(hù)色譜柱和儀器。篩板使用一段時(shí)間后,，攔截的污染物會(huì)堵塞篩板,，因此需要定期更換。但是相較于損壞色譜柱,，更換一個(gè)篩板顯得性價(jià)比更,，成本更低廉。
溶劑問題
反相色譜流動(dòng)相多為甲醇,、乙腈,、水，實(shí)驗(yàn)中往往會(huì)從中加各種添加劑以改善分離性能,。有時(shí)候?yàn)榱藰悠返娜芙庑曰蚍€(wěn)定性加入了一點(diǎn)的緩沖液,，但是緩沖液的酸堿性可能會(huì)導(dǎo)致樣品轉(zhuǎn)化，從而產(chǎn)生雙峰現(xiàn)象,?？梢愿鼡Q緩沖液或者更換流動(dòng)相試一試。
影響雙峰出現(xiàn)的原因還有多,，比如樣品過柱載量,，從而導(dǎo)致二次分配；儀器間隔記錄時(shí)間太短都有可能造成雙峰出現(xiàn),。因此具體情況要具體分析,，以上僅供各位色譜工作者參考,。
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