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夏女士
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想讓色譜柱用的久,,得“好好用”才行!
閱讀:1975發(fā)布時間:2021-7-21
大家都知道一根色譜柱是比較昂貴的,,作為一個色譜耗材,,當(dāng)然是讓色譜柱使用壽命盡量延長以降低成本。而影響色譜柱的使用壽命的因素大多的使用時的操作不當(dāng)導(dǎo)致?lián)p壞色譜柱,。想讓色譜柱用的久,,得“好好用”才行!
使用前,,做好這三個階段的操作注意事項:
一,、使用前準(zhǔn)備:
因為生物的復(fù)雜性,,樣品純化程度越,色譜柱的使用壽命就越長,,因此樣品的預(yù)處理是十分重要的,。比如溶劑的選擇、樣品過濾等,。我們可以選擇色譜的純水作為溶劑,,并且使用溶劑進(jìn)樣口過濾器再過濾一次雜質(zhì)、顆粒物等,,這樣能較加“純凈”,,對延長色譜柱的使用壽命有的幫助作用。
吸濾頭
使用色譜柱前還要考慮其他的影響因素,,如分析物的某些性質(zhì)同樣能影響色譜柱的使用壽命,。酸、堿性物質(zhì)和蛋白質(zhì)類生物大分子,,它們能與固定相填料作用,,或生成不可逆吸附層,改變填料表面特征,,使色譜柱性能發(fā)生變化,,終導(dǎo)致分離失效。
二,、使用過程中:
避免機(jī)械沖擊,,如果泵啟動太快,流速和柱壓的瞬間升,,柱床受到?jīng)_擊,,會造成色譜柱損壞;
利用柱箱保持柱溫恒定,,于柱溫承受的范圍,,會增加對流動相中化學(xué)物質(zhì)的吸附,還可能改變峰形,,降低柱效,,造成不可逆性的損傷。
逐漸改變工作流量和壓力,,切勿進(jìn)行突然更改。流速過大,,壓力升,,會引起色譜填料沖垮、塌陷,。
在適宜的pH范圍內(nèi)運行,,以硅膠作基質(zhì)的固定相一般要求pH在2.5~7范圍內(nèi)使用,。長期在pH>7或pH<2使用環(huán)境中,硅膠會逐漸溶解或者表面鍵合的官能團(tuán)會逐漸流失,。
避免進(jìn)行大體積的進(jìn)樣導(dǎo)致色譜柱載,,不要過度用力擰色譜柱,可能會造成損壞,。
三,、使用后的清洗與儲存:
色譜柱使用后要注意清洗,用較的流動相沖洗,,如果還是無法清洗干凈,,可以采用更的洗脫劑清洗。
色譜柱清洗完畢后,,絕對不要將色譜柱存儲在冰箱或熱風(fēng)烤箱中,,這可能導(dǎo)致固定相不可逆轉(zhuǎn)的損壞。使用前后輕拿輕放,,注意不要磕碰或者用力撞擊導(dǎo)致?lián)p壞,。
即使在采取了建議的預(yù)防措施之后,由于色譜柱的使用壽命有限,,其性能也會受到影響,。您應(yīng)該定期注意色譜柱的性能,并采取措施觀察峰形的下降,,保留時間的變化,,分離度差或出現(xiàn)不需要的峰。
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