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液相色譜梯度洗脫的原理和配置
閱讀：7240發(fā)布時(shí)間：2021-3-25
液相色譜梯度洗脫的原理和配置
梯度洗脫是指在同一個(gè)分析周期中隨著時(shí)間的變化按一定程序梯度性地改變洗脫液的比例(濃度配比、成分,、離子度,、溶液性等)或pH，以期將層析柱上不同的組分洗脫出來(lái)的方法,。從而可以使一個(gè)復(fù)雜樣品中性質(zhì)（性）差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達(dá)到良好的分離目的,。梯度洗脫一般分為二元壓梯度，二元低壓梯度和四元低壓梯度,；二元壓梯度需要兩臺(tái)壓泵,，二元低壓梯度和四元低壓梯度都是只需要一臺(tái)壓泵和一個(gè)比列閥。
梯度洗脫的原理如下：
具體地講,，當(dāng)樣品隨梯度起點(diǎn)的流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱入口時(shí),，由于起點(diǎn)流動(dòng)相中弱洗脫溶劑A含量較，洗脫溶劑B含量較低,，化合物C1(保留性適中)和化合物C2(保留較)因分配系數(shù)(k值)較而滯留于色譜柱入口附近,，幾乎未移動(dòng)。一段時(shí)間后,，B增加到一定數(shù)值,，C1的k值達(dá)到足夠小(比如小于10)，其在柱中的移動(dòng)速率明顯增大,，并且隨著B的增加,，其移動(dòng)速率愈加快速，直到tC1時(shí)流出色譜柱,，被檢測(cè)器檢測(cè)到并被記錄成色譜峰C1,，tC1雖然比等度時(shí)的保留時(shí)間長(zhǎng)多，但C1的的平均k值卻小,，因而色譜峰并未展寬,，靈敏度仍處于較水平。B持續(xù)增加，在隨后的某個(gè)時(shí)間點(diǎn),，C2的k值也降到10以下,，C2的移動(dòng)速率也開始變快,，以與C1類似的方式于tC2被洗脫出色譜柱，其平均k值同樣小，色譜峰亦未展寬,，靈敏度處于較水平,。
流動(dòng)相的梯度變化即流動(dòng)相性,、PH值等的梯度變化,，即洗脫能力成梯度變化。
梯度洗脫配置相對(duì)復(fù)雜,，配置特點(diǎn)：
1.二元壓梯度洗脫需要配置兩臺(tái)壓泵,，一個(gè)混合器及連接管理，配置較,，成本,；
2.二元低壓梯度洗脫需要配置一臺(tái)壓泵、一個(gè)二元比例閥,、一臺(tái)在線脫氣機(jī),、一個(gè)混合器（脫氣機(jī)和混合器視情況而定，可不選）及連接管路,，配置較低,，成本較低；
3.四元低壓梯度洗脫需要配置一臺(tái)壓泵,、一個(gè)四元比例閥,、一臺(tái)在線脫氣機(jī)、一個(gè)混合器（視情況而定,，可不選）及連接管路,，配置較，成本較低,。
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