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液相色譜儀對流動相的要求
閱讀：6383發(fā)布時間：2017-12-4
1 純度 流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細(xì)的膜過濾),。溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累,，會影響色譜柱的使用壽命。
2 溶解度 樣品的溶解度要適宜如果溶解度,，如果溶解度欠佳樣品會在柱頭沉淀,，不但影響純化分離，還會縮短柱子的使用壽命,。
3 粘度 要低(應(yīng)<2cp) 粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴散,、傳質(zhì)，降低柱效,，還會使柱壓降增加,，使分離時間延長。選擇沸點在100℃以下的流動相,。
4 樣品易于回收,。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。
5 流動相 PH 采用反相色譜法分離弱酸(3≤pKa≤7)或弱堿(7≤pKa≤8)樣品時,，通過調(diào)節(jié)流動相的pH值,，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留,，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù),。對于弱酸，流動相的pH值越小,，組分的k值越大,，當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時，弱酸主要以分子形式存在;對弱堿,，情況相反,。分析弱酸樣品時，通常在流動相中加入少量弱酸,，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液;分析弱堿樣品時,，通常在流動相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液,。
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