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前言

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局，國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)發(fā)布即將實(shí)施的食品中乙?；前匪徕浀臏y(cè)定方法,，該標(biāo)準(zhǔn)適用于乳及乳制品，冷凍飲品,、水果制品,、蔬菜制品、食用菌和藻類(lèi),、豆類(lèi)制品,、堅(jiān)果與籽類(lèi)、糖果,、糧食制品,、焙烤食品、調(diào)味品,、飲料,、酒類(lèi)、果凍中乙?；前匪徕浀臏y(cè)定,。

本實(shí)驗(yàn)參考標(biāo)準(zhǔn)《GB 5009.140-2023 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乙?；前匪徕浀臏y(cè)定》,，使用EZsep™AL-N固相萃取柱進(jìn)行樣品凈化，高效液相色譜進(jìn)行檢測(cè),，建立了一種對(duì)果汁中乙?；前匪徕浀姆治龇椒ā?/span>

1,、實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1.1 儀器與試劑

LC-20AD液相色譜儀，島津企業(yè)管理（中國(guó)）有限公司,；

MPREP-SPE08手動(dòng)固相萃取裝置,，貨號(hào)：PZ0008，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司,；

EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL）,，貨號(hào)：PZ11423，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司,；

冷凍離心機(jī)，GL-20G-Ⅱ,，上海安亭科學(xué)儀器廠,；

甲醇（色譜純），購(gòu)自賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司,；

乙腈（色譜純），購(gòu)自賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司,；

硫酸銨（分析純）,，購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

水中安賽蜜溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),，1000μg/mL，壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司,。

1.2 工作液配制

取水中安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1mL,，用水稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為10μg/mL的色素混標(biāo)中間液,。

分別移取10μg/mL的色素混標(biāo)中間液0.01、0.02,、0.05,、0.1、0.2,、0.5用水稀釋至1.0mL容量瓶中,，得到濃度分別為0.1、0.2,、0.5,、1、2,、5μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,。

1.3 實(shí)驗(yàn)部分

準(zhǔn)確稱(chēng)取果汁試樣5.0g，置于50mL具塞離心管中,，先加入20mL水,，渦旋1min,超聲提取20min，10000r/min離心5min，上清液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中,，再向離心管中加水20mL,，混勻后超聲5min并離心。合并上清液,用水定容至刻度,，混勻,。準(zhǔn)確吸取提取液5mL，作為待凈化液,，待凈化,。

將EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號(hào)：PZ11423,，分別以10mL乙腈,、10mL水活化后，取待凈化液上樣,，收集流出液,。分別用2mL甲醇-乙腈-硫酸銨溶液(5+10+85)洗脫液洗滌固相萃取柱2次,，收集流出液,，合并3次流出液，并用洗脫液定容至10mL,，混勻,，用PTFE微孔濾膜過(guò)濾，高效液相色譜測(cè)定,。

1.4 LC分析

色譜柱：C18柱（250mm×4.6mm,，5μm）；

流動(dòng)相：A:0.02mol/L硫酸銨溶液 B:甲醇,；

流速：1.0mL/min,；

檢測(cè)波長(zhǎng)：227nm；

進(jìn)樣量：10μL,。

表1 流動(dòng)相梯度洗脫表

2,、       實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 加標(biāo)回收率結(jié)果

圖1 乙酰磺胺酸鉀標(biāo)準(zhǔn)色譜

圖2 樣品空白標(biāo)準(zhǔn)色譜

圖3 樣品加標(biāo)色譜圖

3,、結(jié)論

本次實(shí)驗(yàn)使用EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL）,，貨號(hào)：PZ11423,，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司，對(duì)肉果汁中乙?；前匪徕涍M(jìn)行測(cè)定,，其加標(biāo)回收率范圍在89.4%~100.3%之間，RSD為4.7%。準(zhǔn)確性和精密度均滿足GB 5009.140-2023要求,，且實(shí)驗(yàn)方法穩(wěn)定,、可靠。

4,、參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.140-2023 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乙?；前匪徕浀臏y(cè)定