人Dickkopf-1試劑盒
人Dickkopf-1試劑盒報價,，咨詢選購,，技術服務，選擇正確的實驗試劑或材料是實驗成功的關鍵,。
一,、客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張）,，排除細胞本身污染的情況,；
收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞,。
二,、如為貼壁細胞，請在顯微鏡下觀察細胞密度：
1. 未超過80%匯合度時,，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作,；然后打開蓋子,，先把培養(yǎng)基吸出10ml左右，放在離心管里,，然后瓶口過火（嚴禁直接傾倒）,，這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管,，將剩余的培液全部吸出,，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調整）之后,，傳代或者凍存。
2. 超過80%匯合度時,，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：
1) 棄去培養(yǎng)液，用3ml PBS（不含鈣,，鎂離子）洗1-2次,；
2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中，倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓分散,，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來,；
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,，吸出,，分到新的培養(yǎng)瓶中，按要求分瓶。
三,、如為懸浮細胞,，吸出培養(yǎng)液，1000轉/分鐘離心5分鐘,，吸出上清,，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
注意：換液時一半用我們的培養(yǎng)基,，一半用你們的,，以免細胞不適應而造成生長不好。
四,、細胞出現(xiàn)問題,，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么,？
?。?）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失,、破損,、漏液等，重發(fā),；
（2）凍存的細胞復蘇后,，絕大多數(shù)細胞未存活,，重發(fā)；
?。?）存活的細胞靜置24小時后,，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā),；
?。?）凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染,，重發(fā),；
（5）視具體情況而定,?！?/p>
細胞培養(yǎng)技術3個原則：1、用自己的一套試劑,，不要和別人混用,；2、勤觀察細胞，像養(yǎng)寵物一樣喜愛和關心,；3,、有規(guī)律地換液和傳代，不要“三天打魚,，兩天曬網(wǎng)”,。凍存細胞時間為5-7個工作日，活細胞為7-15個工作日,。
