人C-肽試劑盒
人C-肽試劑盒報(bào)價(jià),，咨詢選購(gòu)，技術(shù)服務(wù),，選擇正確的實(shí)驗(yàn)試劑或材料是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵,。
一、客戶收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,，顯微鏡下拍細(xì)胞100X,，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況,；
收到細(xì)胞未開(kāi)封,，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
二,、如為貼壁細(xì)胞,，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度：
1. 未超過(guò)80%匯合度時(shí)，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,，噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),，嚴(yán)格無(wú)菌操作；然后打開(kāi)蓋子,，先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,，放在離心管里，然后瓶口過(guò)火（嚴(yán)禁直接傾倒）,，這樣可以保證不污染,，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出,，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時(shí)間根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況調(diào)整）之后,，傳代或者凍存。
2. 超過(guò)80%匯合度時(shí),，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：
1) 棄去培養(yǎng)液,，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次,；
2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中,，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,，細(xì)胞隨即脫落下來(lái),；
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出,，分到新的培養(yǎng)瓶中,，按要求分瓶。
三,、如為懸浮細(xì)胞,，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,，吸出上清,，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
注意：換液時(shí)一半用我們的培養(yǎng)基,，一半用你們的,，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。
四,、細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么,？
?。?）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失,、破損,、漏液等，重發(fā),；
?。?）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,，重發(fā),；
（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,，重發(fā),；
（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,，出現(xiàn)污染,，重發(fā)；
?。?）視具體情況而定,。
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)3個(gè)原則：1,、用自己的一套試劑,，不要和別人混用；2,、勤觀察細(xì)胞,，像養(yǎng)寵物一樣喜愛(ài)和關(guān)心；3,、有規(guī)律地?fù)Q液和傳代,，不要“三天打魚，兩天曬網(wǎng)”,。凍存細(xì)胞時(shí)間為5-7個(gè)工作日,，活細(xì)胞為7-15個(gè)工作日。
