供貨周期 |
一個月 |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
人乳頭瘤病毒L1試劑盒,,運用免疫或核酸檢測技術(shù),測樣本 L1 蛋白或基因,。經(jīng)規(guī)范采樣,、加樣等操作,靈敏度高,、特異性強(qiáng),,用于宮頸癌篩查、感染診斷與疫苗評估 ,。
人乳頭瘤病毒L1試劑盒介紹
人乳頭瘤病毒L1試劑盒是用于體外檢測人樣本中 HPV L1 蛋白相關(guān)情況的重要工具,,在 HPV 感染相關(guān)疾病的研究、診斷及防控中具有關(guān)鍵意義,。
檢測原理
免疫檢測法:常采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù),,以雙抗體夾心法為主。試劑盒內(nèi)的微孔板預(yù)先包被有針對 HPV L1 蛋白的特異性抗體,。當(dāng)加入待測樣本(如血清,、宮頸脫落細(xì)胞裂解液等)時,若樣本中存在 HPV L1 蛋白,,其會與包被抗體特異性結(jié)合,。隨后加入酶標(biāo)記的抗 HPV L1 蛋白抗體,該抗體與已結(jié)合在包被抗體上的 HPV L1 蛋白進(jìn)一步結(jié)合,形成 “包被抗體 - HPV L1 蛋白 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物,。加入底物溶液后,,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顯色反應(yīng),,通過酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度(OD 值),,并與試劑盒提供的臨界值比較,判斷樣本中是否存在 HPV L1 蛋白及其大致含量情況,。
核酸檢測關(guān)聯(lián)法:HPV 病毒的 L1 基因編碼 L1 蛋白,。部分試劑盒通過檢測樣本中 HPV L1 基因的存在與否及含量,間接反映 L1 蛋白的情況,。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),,設(shè)計針對 HPV L1 基因的特異性引物,對樣本中的核酸進(jìn)行擴(kuò)增,。通過熒光標(biāo)記的探針或其他檢測手段,,實時監(jiān)測擴(kuò)增過程中熒光信號的變化,從而判斷樣本中是否存在 HPV L1 基因及病毒載量,,進(jìn)而推測 L1 蛋白表達(dá)情況,。
使用方法
樣本采集:若為免疫檢測,血清樣本需待血液自然凝固后離心獲??;對于宮頸脫落細(xì)胞裂解液樣本,使用專用采樣刷在宮頸口采集細(xì)胞,,然后將采樣刷放入含裂解液的保存管中充分振蕩,,使細(xì)胞裂解。若為核酸檢測關(guān)聯(lián)法,,采集宮頸脫落細(xì)胞,、陰道分泌物等樣本,放入專用保存液中,。采集后的樣本均需妥善保存,,避免反復(fù)凍融影響檢測結(jié)果。
試劑盒準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,,在室溫(20℃ - 25℃)平衡 30 分鐘,,確保試劑盒內(nèi)各試劑溫度均勻。同時準(zhǔn)備好移液器,、吸頭,、酶標(biāo)儀(免疫檢測)或 PCR 儀(核酸檢測關(guān)聯(lián)法)等實驗器材,并檢查其性能是否正常,。
加樣與反應(yīng):按照試劑盒說明書,將標(biāo)準(zhǔn)品(如有)、待測樣本及空白對照按規(guī)定體積準(zhǔn)確加入相應(yīng)反應(yīng)體系中,,如微孔板孔(免疫檢測)或 PCR 反應(yīng)管(核酸檢測關(guān)聯(lián)法),。根據(jù)設(shè)定的溫度和時間進(jìn)行孵育或擴(kuò)增反應(yīng)。
結(jié)果檢測與判定:免疫檢測使用酶標(biāo)儀在規(guī)定波長下測定各孔 OD 值,,將樣本的 OD 值與試劑盒提供的臨界值比較,,判定樣本中是否存在 HPV L1 蛋白。核酸檢測關(guān)聯(lián)法通過 PCR 儀自帶的分析軟件讀取熒光信號,,根據(jù)設(shè)定的閾值和標(biāo)準(zhǔn)曲線判斷樣本中是否存在 HPV L1 基因及病毒載量,。
性能特點
高靈敏度:能夠檢測到極低含量的 HPV L1 蛋白或其相關(guān)基因,有助于早期發(fā)現(xiàn) HPV 感染及相關(guān)疾病,。
特異性強(qiáng):無論是免疫檢測的抗體,,還是核酸檢測的引物和探針,對 HPV L1 蛋白或基因具有高度特異性,,與其他病毒或蛋白交叉反應(yīng)極小,,保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
操作簡便:試劑盒的操作流程相對標(biāo)準(zhǔn)化,,經(jīng)過簡單培訓(xùn)的人員即可進(jìn)行操作,,適合各級醫(yī)療機(jī)構(gòu)和實驗室使用。
應(yīng)用場景
宮頸癌篩查:HPV L1 蛋白的檢測可輔助宮頸癌的早期篩查,,結(jié)合其他指標(biāo),,提高篩查的準(zhǔn)確性。
HPV 感染診斷:用于判斷個體是否感染 HPV,,尤其是在無法直接檢測病毒顆粒時,,通過檢測 L1 蛋白或基因可有效診斷感染情況。
疫苗效果評估:在 HPV 疫苗接種后,,檢測血清中 HPV L1 抗體或 L1 蛋白表達(dá)變化,,評估疫苗的免疫效果。