供貨周期 |
一個(gè)月 |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
人空腸彎曲菌黏附蛋白試劑盒,,用于科研檢測,,適用多樣標(biāo)本。雙抗夾心 ELISA 法,,操作嚴(yán)謹(jǐn),,注意事項(xiàng)明確,助您精準(zhǔn)測定,。
人空腸彎曲菌黏附蛋白試劑盒介紹
人空腸彎曲菌黏附蛋白試劑盒,,英文名為 Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit ,常用于科研實(shí)驗(yàn)中對人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)的檢測,。該試劑盒能夠?qū)ρ?、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等多種標(biāo)本進(jìn)行檢測分析,。
一、檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法,。首先,,將抗體包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品加入后,,其中的目標(biāo)物會(huì)與包被抗體特異性結(jié)合,,隨后洗去游離的成分。接著依次加入生wu素化抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素,,生wu素化抗體與結(jié)合在包被抗體上的目標(biāo)物結(jié)合,同時(shí)生wu素與親和素特異性結(jié)合,,從而形成免疫復(fù)合物,,再次洗去游離成分。最后加入顯色底物,,在辣根過氧化物酶的催化下,,無色的 TMB 底物呈現(xiàn)藍(lán)色,加入終止液后變?yōu)辄S色,。通過酶標(biāo)儀在 450nm 波長處測量 OD 值,,目標(biāo)物的濃度與 OD450 值之間呈正比關(guān)系,借此通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線來精確求出標(biāo)本中目標(biāo)物的濃度,。
二,、操作步驟
標(biāo)本收集與準(zhǔn)備:血清、血漿樣本收集應(yīng)使用無熱原和內(nèi)毒素試管,避免使用溶血,、高血脂標(biāo)本,,懸浮物需離心去除。標(biāo)本收集后盡早檢測,,2 - 8℃可保存 48 小時(shí),,如需長時(shí)間保存則需冷凍(-20℃或 -80℃),,且要避免反復(fù)凍融,。
試劑準(zhǔn)備:如將濃縮洗滌液用蒸餾水按比例稀釋;對標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行精確的對倍稀釋,;使用前 20 分鐘用生wu素化抗體稀釋液將 100× 生wu素化抗體稀釋成 1× 工作液,;使用qian10 分鐘將 TMB 顯色液 A 液和 B 液 1:1 混合。
加樣與溫育:在酶標(biāo)包被板上進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品孔,、空白孔及待測樣品孔的加樣操作,,加樣后用封板膜封板,置于 37℃溫育相應(yīng)時(shí)間,。
洗滌與加酶:溫育結(jié)束后進(jìn)行洗滌操作,,之后每孔加入酶標(biāo)試劑(空白孔除外)。
顯色與終止:依次加入顯色劑 A 和 B 進(jìn)行顯色反應(yīng),,之后加入終止液終止反應(yīng),。
測定:以空白空調(diào)零,在 450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值),,并在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)完成測定,。
三、注意事項(xiàng)
試劑盒從冷藏環(huán)境取出后,,需在室溫平衡 15 - 30 分鐘方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后若未用完,板條應(yīng)裝入密封袋保存,。
濃洗滌液若有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可水浴加溫助溶,不影響洗滌結(jié)果,。
加樣應(yīng)使用加樣器并經(jīng)常校對準(zhǔn)確性,,一次加樣時(shí)間最好控制在 5 分鐘內(nèi),標(biāo)本數(shù)量多可使用排槍加樣,。
嚴(yán)格按照說明書操作,,試驗(yàn)結(jié)果判定以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn) ,。