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小鼠增殖細胞核抗原試劑盒

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更新時間:2024-01-29 10:00:50瀏覽次數(shù):493次

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小鼠增殖細胞核抗原試劑盒

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 購買上海乾思生物細胞注意事項(乾思生物)發(fā)布

  一,、客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,,200X各一張),,排除細胞本身污染的情況;

  收到細胞未開封,,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞,。

  二、如為貼壁細胞,,請在顯微鏡下觀察細胞密度:

  1. 未超過80%匯合度時,,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),,嚴(yán)格無菌操作,;然后打開蓋子,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,,放在離心管里,,然后瓶口過火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,,再用10ml的移液管,,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存,。

  2. 超過80%匯合度時,,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

  1) 棄去培養(yǎng)液,,用3ml PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次,;

  2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,,細胞隨即脫落下來;

  3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,,吸出,,分到新的培養(yǎng)瓶中,按要求分瓶,。

  三,、如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶,。

  注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,,一半用你們的,以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好,。

  四,、細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些,?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么,?

  (1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失,、破損,、漏液等,,重發(fā),;

 ?。?)凍存的細胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,,重發(fā),;

 ?。?)存活的細胞靜置24小時后,,絕大多數(shù)細胞未存活,,重發(fā);

 ?。?)凍存的細胞復(fù)蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,,出現(xiàn)污染,重發(fā),;

 ?。?)視具體情況而定?!?/p>

  Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌,;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,,另常備 Trizol DMSO lipo2000 lipo3000 SC-2004 SC-2005常備現(xiàn)貨 ,;貨期短,價格優(yōu),,售后齊全,。

    細胞培養(yǎng)技術(shù)3個原則:1、用自己的一套試劑,,不要和別人混用,;2、勤觀察細胞,,像養(yǎng)寵物一樣喜愛和關(guān)心,;3、有規(guī)律地換液和傳代,,不要“三天打魚,,兩天曬網(wǎng)"。
  質(zhì)量可靠,,售后有保障




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