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小鼠CD30分子試劑盒

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更新時間:2023-11-10 16:05:03瀏覽次數(shù):313次

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 購買上海乾思生物細胞注意事項(乾思生物)發(fā)布

  一,、客戶收到細胞先不開蓋,,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),,排除細胞本身污染的情況,;

  收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞,。

  二,、如為貼壁細胞,請在顯微鏡下觀察細胞密度:

  1. 未超過80%匯合度時,,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,;然后打開蓋子,,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,放在離心管里,,然后瓶口過火(嚴禁直接傾倒),,這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,,將剩余的培液全部吸出,,放于離心管中,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調整)之后,,傳代或者凍存。

  2. 超過80%匯合度時,,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。具體步驟如下:

  1) 棄去培養(yǎng)液,用3ml PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次,;

  2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,,倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,,細胞隨即脫落下來,;

  3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,,分到新的培養(yǎng)瓶中,,按要求分瓶。

  三,、如為懸浮細胞,,吸出培養(yǎng)液,1000轉/分鐘離心5分鐘,,吸出上清,,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

  注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,,一半用你們的,,以免細胞不適應而造成生長不好。

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