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兔子內(nèi)皮抑素試劑盒

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更新時(shí)間:2023-11-10 16:09:12瀏覽次數(shù):443次

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兔子內(nèi)皮抑素試劑盒

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  一、客戶(hù)收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,,200X各一張),,排除細(xì)胞本身污染的情況;

  收到細(xì)胞未開(kāi)封,,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞,。

  二、如為貼壁細(xì)胞,,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度:

  1. 未超過(guò)80%匯合度時(shí),,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),,嚴(yán)格無(wú)菌操作,;然后打開(kāi)蓋子,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,,放在離心管里,,然后瓶口過(guò)火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,,再用10ml的移液管,,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時(shí)間根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存,。

  2. 超過(guò)80%匯合度時(shí),,請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

  1) 棄去培養(yǎng)液,,用3ml PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次;

  2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,,細(xì)胞隨即脫落下來(lái),;

  3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,,按要求分瓶,。

 



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